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HLAI类基因多态性与白血病易感性的关联性研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：HLAI类基因多态性与白血病易感性的关联性研究 1 1 材料与方法 2 2 结果 3 3 讨论 4 文2：HLAI类基因多态性与白血病易感性的关联性研究医学论文 6 1 材料与方法 7 2 结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 HLAI类基因多态性与白血病易感性的关联性研究 文1：HLAI类基因多态性与白血病易感性的关联性研究 Correlation between gene HLAclass I　polymorphism and susceptibility to leukemia ABSTRACT: Objective To explore the correlation between gene HLAclass I polymorphism and susceptibility to leukemia in Chinese Gau Han people and search for the genes susceptible to leukemia. Methods HLAA and B alleles polymorphism in 65 patients with leukemia and 48 normal subjects were determined by PCR with sequence specific oligucleotide probe (PCRSSO). Results The allele frequencies of HLAA01 and B38 were increased (P KEY WORDS: human leukocyte antigen (HLA); leukemia; PCRSSO; polymorphism 近30年来，尽管白血病的基础研究和临床疗效有了长足进展，但白血病的确切发病机制尚不清楚。多数学者认为，白血病除了与外界环境因素如物理、化学、生物等有关外，不同患者对白血病的遗传易感性及免疫功能不尽相同[1]，具有高度多态性。与抗原呈递和识别有关的人类白细胞抗原(human leukocyte antigen， HLA)分子，可能是导致白血病的重要遗传因素之一[2]。本研究采用聚合酶链反应和序列特异性寡核苷酸探针(polymerase chain reactionsequence specific olignuliotide probe， PCRSSO)的方法，对甘肃省汉族白血病患者HLAI类基因A、B进行基因分型，研究其基因多态性与白血病的相关性。 1 材料与方法 研究对象 病例组：兰州大学第一医院1998-2006年收住的部分白血病患者65例，按照白血病的形态学免疫学细胞遗传学分子生物学(MICM)分型法诊断标准确诊。年龄在2-71岁，平均年龄30岁，其中男性45例，女性20例。正常对照组：按照随机原则，选取同时期同一地区48例与患者无血缘关系的正常健康者。年龄在18-50岁，其中男性26例，女性22例。白血病患者治疗前和对照组每例抽取外周血3mL， EDTA抗凝，放置于-20℃冰箱备用。 主要试剂和仪器 DNA提取试剂盒(德国QIAGEN公司)；SSOHLA分型试剂盒(英国Dynal公司)；2400型PCR仪(美国PE公司)；双槽恒温水浴摇床(美国Robbi Scientific公司)；台式低温高速离心机(德国Heraeus公司)；UV754型紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司) 方法 基因组DNA的提取 采用德国QIAGEN公司DNA提取试剂盒，从研究对象的病例组和正常对照组全血中提取基因组DNA，按说明书操作。用紫外分光光度计测定DNA溶液纯度，当A260/A280值在时，表明DNA纯度较高，放置于-20℃冰箱备用。 等位基因HLAA、B分型 采用PCRSSO方法，用英国Dynal RELITMSSOHLA分型试剂盒。分别用不同引物扩增具有高度多态性的HLAA、B位点第二、第三外显子，将扩增产物变性，使其成为单链，加到含有序列特异性寡核苷酸探针的尼龙薄膜上，使生物素标记的扩增产物与膜上探针结合，通过与亲和素辣根过氧化物酶反应，用H2O2和四甲基联苯胺显色，记录探针杂交情况，通过分析软件Dynal Biotech PMP 得出该样本HLA基因型别。 统计学分析 采用四格表卡方检验，用统计软件进行统计学处理，P1)和预防分数(prevent