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酵母菌的有性杂交育种 （一）酵母菌的生活史 （二）酵母菌有性杂交技术 酵母菌有性杂交程序一般为： 亲本的单倍化 ↓ 有性杂交 ↓ 杂交后代的检出 ↓ 筛选优良性状个体 第94页，共129页，编辑于2022年，星期日 S. Cerevisiae 的双倍体和单倍体细胞的比较 项 目 双倍体 单倍体 细 胞 大，椭圆形 小，球形 菌 落 大，形态均一 小，形态变化较多 液体培养 繁殖快，细胞较分散 繁殖较慢，细胞常聚集成团 在产孢子培养基上 形成子囊及子囊孢子 不形成子囊 第95页，共129页，编辑于2022年，星期日 定义和意义： 类似于有性生殖但更原始的生殖方式，是通过同一物种两个不同菌株的体细胞发生融合，不经过减数分裂而导致低频率基因重组并产生重组子。 为半知菌育种提供了一个重要手段。 存在范围：常见于一些真菌尤其是半知菌中 （二）准性生殖（parasexual hybridization） 第96页，共129页，编辑于2022年，星期日 准性生殖的过程： ①菌丝联结 ②异核体形成（质配） ③核配形成杂合二倍体 ④体细胞交换和单倍体化。 第97页，共129页，编辑于2022年，星期日 准性生殖与有性生殖的比较 项 目 准性生殖 有性生殖 参与接合的亲本细胞 形态相同的 形态或生理上有 体细胞 分化的性细胞 独立生活的异核体阶段 有 无 接合后双倍体细胞形态 与单倍体 与单倍体 基本相同 明显不同 双倍体变单倍体 的途径 通过有丝分裂 通过减数分裂 接合发生的几率 偶然发现， 正常出现， 几率低 几率高 第98页，共129页，编辑于2022年，星期日 夹层培养法（同一培养皿） 小菌落是第二次长起来的（营养缺陷型） ③检出营养缺陷型：具体方法很多。 用含有特定生长因子的基本培养基作 第四层可直接分离到相应的营养缺陷型 第62页，共129页，编辑于2022年，星期日 限量补充培养法（同一培养皿） 微量蛋白胨的完全培养基上 小菌落是营养缺陷型突变株 若想获得某一特定营养缺陷型突变株，只要在基本培养基上加入微量的相应物质就可以达到。野生型细胞能迅速长成大的菌落，而营养缺陷型则因营养受限制生长缓慢。 第63页，共129页，编辑于2022年，星期日 逐个检出法（两个培养皿） 涂布 培养 基本培养基上不长菌落 完全培养基上长出菌落 含诱变剂的液体培养基 菌种 营养缺陷型 第64页，共129页，编辑于2022年，星期日 影印接种法 （两个培养皿） 第65页，共129页，编辑于2022年，星期日 ④鉴定缺陷型：可生用长谱法进行鉴定。 缺陷型菌株生长谱测定 第66页，共129页，编辑于2022年，星期日 第三节 基因重组和杂交育种 基因重组（遗传重组，重组）：两个独立基因组内的遗传基因，通过一定的途径转移到一起，形成新的稳定基因组的过程。 重组是在核酸分子水平上的一个概念，而杂交是在细胞水平上进行的，但其中包含了核酸分子水平上的重组。基因重组是杂交育种的理论基础。 微生物基因重组的形式较多。 第67页，共129页，编辑于2022年，星期日 一、原核生物的基因重组 二、真核微生物的基因重组 第68页，共129页，编辑于2022年，星期日 一、原核生物的基因重组 原核生物的基因重组形式很多：转化、转导、接合、原生质体融合。 其特点为： 1. 片段性，仅一小段DNA序列参与重组； 2. 单向性，即从供体菌向受体菌（或从供体基因向受体基