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第1页,共32页,编辑于2022年,星期日 (一)转化作用的发现 有荚膜,致病 肺炎链球菌 一、转化 第2页,共32页,编辑于2022年,星期日 第3页,共32页,编辑于2022年,星期日 (二)自然转化作用 1.感受态的出现 感受态:细菌能从周围环境中吸取DNA的生理状态称为~,是细菌生长到某一特定阶段的一种生理特性,这时细菌表面出现许多双链DNA结合位点。感受态的出现与遗传和环境都有关系。 DNA结合蛋白 核酸酶 感受态特有的单链DNA结合蛋白 第4页,共32页,编辑于2022年,星期日 (二)自然转化作用 2.双链DNA的结合和进入 3.DNA的整合 第5页,共32页,编辑于2022年,星期日 (三)人工转化 1.大肠杆菌的转化(Ca2+介导的转化) 大肠杆菌 50~100mmol/L Ca2+ 感受态 外源DNA 42 ℃热激 转化子 冰浴20~40min 第6页,共32页,编辑于2022年,星期日 质粒携带外源DNA进入细胞的转化过程 第7页,共32页,编辑于2022年,星期日 (三)人工转化 2.PEG介导的转化 枯草芽孢杆菌 等渗溶液 质粒DNA 转化子 溶菌酶 PEG 第8页,共32页,编辑于2022年,星期日 (三)人工转化 3.电转化 电场脉冲使细胞膜形成小孔,外源DNA片段趁机进入细胞的过程。 第9页,共32页,编辑于2022年,星期日 (一)普遍性转导 通过极少数完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上任何小片段DNA进行“误包”,而将其遗传性状递给受体菌的现象。 二、转导 第10页,共32页,编辑于2022年,星期日 (二)局限性转导 通过部分缺陷噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中,并与后者的基因组整合、重组,形成转导子的现象。 二、转导 第11页,共32页,编辑于2022年,星期日 三、接合 (一)接合现象的发现与证实 第12页,共32页,编辑于2022年,星期日 第13页,共32页,编辑于2022年,星期日 Two E. coli in an early stage of conjugation 第14页,共32页,编辑于2022年,星期日 (二)F因子的结构及存在状态 F因子,又称F质粒,是E. coli等细菌决定性别并有转移能力的质粒。 大小:100kb, 形状:cccDNA tra:30kb,转移区 oriT:转移起始点 oriS :复制起始点 rep :复制酶基因 inc:不相容群 IS:转座因子 基因: 1.F因子的遗传结构 第15页,共32页,编辑于2022年,星期日 The F plasmid IS:插入序列γδ:Tn1000 tra基因:编码性菌毛合成与接合所需的蛋白 rep:编码DNA复制的蛋白 oriV:环状DNA复制的起点 oriT:滚环复制及接合时基因转移的起点 第16页,共32页,编辑于2022年,星期日 E.Coli的4种接合类型 F+菌株 F-菌株 Hfr菌株 F`菌株 P.230. 第17页,共32页,编辑于2022年,星期日 2.F因子在E. coli细胞中的存在状态 第18页,共32页,编辑于2022年,星期日 (三)F因子与接合作用 F+×F- Hfr×F- F`×F- 第19页,共32页,编辑于2022年,星期日 第20页,共32页,编辑于2022年,星期日 5` 5` traYZ 内切酶 oriT 第21页,共32页,编辑于2022年,星期日 基因发生高频重组 第22页,共32页,编辑于2022年,星期日 第23页,共32页,编辑于2022年,星期日
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