微生物的分离和纯培养.pptVIP

1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 问题讨论 第28页，共56页，编辑于2022年，星期日 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 第29页，共56页，编辑于2022年，星期日 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 第30页，共56页，编辑于2022年，星期日 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 第31页，共56页，编辑于2022年，星期日 2、接种 ⑴平板划线法 交叉划线法 连续划线法 第32页，共56页，编辑于2022年，星期日 1、将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环_______ 2、在_______旁冷却接种环，并打开棉塞 3、将试管口通过火焰 4、将已______的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 6、左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划__________条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。 5、将试管通过火焰，并塞上棉塞 火焰 冷却 三至五 7、灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的_______开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。 末端 烧红 8、将平板_____放入培养箱中培养。 倒置 第33页，共56页，编辑于2022年，星期日 问题讨论 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。 杀死上次残留的菌种，保证使下一次划线时，菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。 及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 第34页，共56页，编辑于2022年，星期日 6支试管，分别加入9ml无菌水 1ml 101 1ml 102 1ml 103 1ml 104 1ml 105 1ml 106 ⑵稀释涂布平板法 a.梯度稀释菌液： 菌液 第35页，共56页，编辑于2022年，星期日 b.涂布平板： 滴 灼 试 涂 取0.1ml菌悬液 微量 移液器 第36页，共56页，编辑于2022年，星期日 Pour plate (3)稀释混合平板法（课本P14) 第37页，共56页，编辑于2022年，星期日 将接种后的培养基和一个未接种的培养基，放入37℃恒温箱中倒置培养12h-24h,直到长出菌落为止。 3、培养 第38页，共56页，编辑于2022年，星期日 4、实验结果观察 第39页，共56页，编辑于2022年，星期日 5、菌株的保存方法 （1）临时保藏： 接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 （2）长期保存： 甘油冷冻管藏法 搁置斜面 第40页，共56页，编辑于2022年，星期日 第1页，共56页，编辑于2022年，星期日 微生物: 结构都相当简单，个体多数十分微小，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构。 2、类群 1、特点 第2页，共56页，编辑于2022年，星期日 病毒（无细胞结构、寄生生活） 第3页，共56页，编辑于2022年，星期日 细菌 电子显微镜下的结核杆菌 第4页，共56页，编辑于2022年，星期日 放线菌 第5页，共56页，编辑于2022年，星期日 真菌 青霉菌 酵母菌 第6页，共56页，编辑于2022年，星期日 原生生物 第7页，共56页，编辑于2022年，星期日 病 毒 细 菌 放线菌 真 菌 原生动物 2、类群 无细胞结构 原核细胞 真核细胞 第8页，共56页，编辑于2022年，星期日 微生物的分离和纯培养技术是微生物最基本的实验技术，它包括培养基的制备、灭菌和消毒、接种、培养等步骤 第9页，共56页，编辑于2022年，星期日 内容提要： 微生物及其分类 培养基与各类营养物质 无菌技术 菌落 大肠杆菌的纯化培养 微生物数量的测定 第10页，共56页，编辑于2022年，星期日 1、概念 二、培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求