豆豉山楂复合物对慢传输型便秘大鼠通便作用及其作用机制.docVIP

豆豉山楂复合物对慢传输型便秘大鼠通便作用及其作用机制 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：豆豉山楂复合物对慢传输型便秘大鼠通便作用及其作用机制 1 1、材料 2 2、方法 3 [13] 5 3、结果 6 4、讨论 8 文2：南虎凝胶剂抗炎镇痛作用及其作用机制 9 1材料和方法 10 参考文摘引言： 14 原创性声明（模板） 16 文章致谢（模板） 16 正文 豆豉山楂复合物对慢传输型便秘大鼠通便作用及其作用机制 文1：豆豉山楂复合物对慢传输型便秘大鼠通便作用及其作用机制 慢传输型便秘是指结肠传输功能障碍所致结肠通过时间延长导致的便秘[1]，全球有13%～37%的成年人患有这种常见的慢性难治性胃肠道疾病[2，3]，严重影响患者的生活质量，对其治疗的研究十分重要。诸多研究显示，便秘发病机制的研究主要与结肠Cajal间质细胞有关，c-Kit蛋白及其配体干细胞因子(SCF)结合后激活的信号通路可影响其结构变化;同时与体内P物质、血管活性肠肽、生长抑素、一氧化氮、神经肽Y等激素及神经递质含量异常有关[4，5] 目前临床上主要以促胃肠动力药或各种泻剂治疗便秘，虽在短时间内能缓解，但长期服用会产生药物依赖性，存在惰性结肠、结肠黑便等不良反应[6]。便秘主要是由于脾胃功能失调或大肠传导功能受损，进而导致胃肠道菌群紊乱[7]。豆豉-山楂复合物中豆豉在发酵过程中产生的微生物菌群可调节人体肠道的动态平衡，维持肠道正常功能[8，9]，山楂能够消食健脾，行气消滞，辅以蜂蜜，三者结合可增强和胃健脾、润肠通便作用，进而改善便秘。目前关于豆豉-山楂治疗便秘文献报道较少，作用机制尚不明确，故本文基于STC大鼠模型，以结肠组织ICC信号通路为靶点，初步阐明豆豉-山楂复合物治疗便秘的作用机制，为其作为防治便秘保健食品的开发提供科学依据。 1、材料 实验动物 SPF级雄性SD大鼠60只，(200±20)g[哈尔滨医科大学实验动物学部，许可证号:SCXK(黑)2019-001]。大鼠饲养于黑龙江省中医药科学院动物实验中心，自由取食，饮水，每日给予光照12h，室温20～24℃，相对湿度40%～70%，适应性饲养1周。 仪器 酶标仪(TecanInfiniteM200PRO)，9600荧光定量PCR仪(杭州博日有限公司);OLYMPUSIX3-SVR显微镜(德国卡尔蔡司公司);AI600凝胶成像系统(美国GE公司)Biofuge?Stratos型全能台式高速低温离心机(上海赛默生物科技发展有限公司);IKA?MS3digital型涡旋振荡器(广州仪科实验室技术有限公司);BP-10型分析天平(德国赛多利斯);鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司) 试药 盐酸洛哌丁胺胶囊(西安杨森制药有限公司，批号:H，每片2mg);枸橼酸莫沙必利片(鲁南贝特制药有限公司，批号:H，每片5mg);SP、VIP、SS酶联免疫检测试剂盒(南京建成生物工程研究所，批号分别为H-218-1-2、H-219-1-2、H-092-1-2);GoTaq?1-StepRT-qPCystemA6020试剂盒(Promega生物技术有限公司);SCF、c-Kit、RNACTB引物(上海生工生物工程技术服务有限公司);SCF抗体[SantaCruz生物技术有限公司，批号:SCF(G-3):sc-13126];c-Kit、β-actin抗体(Abcam公司，批号分别为EPR22566-344、TDY041);山羊抗小鼠IgG-HRP二抗[天德悦(北京)生物科技有限公司，批号:S001];TRIzol?Reagent(美国Invitrogen公司，批号:182805) 豆豉(黑龙江省中医药科学院，自制，批号:)与山楂(北京同仁堂药业)质量比为3∶1，辅以适量蜂蜜(南昌恒巢源生物科技公司)，共6g。 2、方法 模型制造 将60只大鼠随机分为空白组、模型组、莫沙必利组和豆豉-山楂复合物高、中、低剂量组，每组10只。除空白组外，其余50只采用洛派丁胺灌胃法[5mg/(kg·d)]复制STC大鼠模型[10]。空白组灌胃给予相同体积蒸馏水，每日一次，连续8d。末次给药后对所有大鼠以10%活性炭混悬液(2mL·kg-1)灌胃，灌胃后开始计时，分笼饲养，记录每只大鼠首粒黑便排出时间。收集造模结束后24h各组大鼠排便粒数进行模型评价[11]，进一步确定造模成功后给药。 药物干预 造模成功后，参照文献[12]中人与大鼠用药剂量转换关系，计算各组大鼠的给药剂量。豆豉-山楂复合物高、中、低剂量组分别按、、/(kg·d)，莫沙必利组按/(kg·d)的剂量灌胃给予·mL-1水的混悬液[13];空白组和模型组给予等体积蒸馏水，每日一