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雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与男性膀胱癌的发生有关（特种医学资料） 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与男性膀胱癌的发生有关 1 1材料和方法 2 文2：雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与男性膀胱癌的发生有关医学论文 6 1材料和方法 7 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 13 正文 雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与男性膀胱癌的发生有关（特种医学资料） 文1：雄激素受体基因第一外显子CAG重复序列长度多态性与男性膀胱癌的发生有关 0引言 膀胱癌是最常见的泌尿系统恶性肿瘤，男性发病率是女性的倍［1］. 除了吸烟和职业因素等环境因素外，性激素的影响可能与这种性别差异有关. 动物实验研究显示，雄性动物对膀胱癌发生比雌性易感，这可能与雄激素或(和)雌激素的作用有关［2］. 雄激素通过雄激素受体（androgen receptor， AR）发挥作用，已经在人膀胱尿路上皮和膀胱尿路上皮癌（urothelial carcinoma， UTC）组织中检测到AR存在［3］. 我们设想，AR介导的反应可能在一定程度上决定了膀胱癌发生率的性别差异；同时，AR功能的差异也可能影响不同个体对这一肿瘤的易感性。 AR是核受体家族的一员，其编码基因位于X染色体的q1112区，有8个外显子组成［4］. 由第一外显子编码的N（氨基）末端区含有正常受体活性所需的转录激活单位，其活性可能与该区域内几个多态性结构有关［5］，其中最为明显的是位于第一外显子的CAG串联短重复序列（shorttandem repeat， STR）. 体外研究显示，AR的转录活性与AR基因 CAG STR的重复次数（n值）呈负相关，n值越小，AR的转录活性越强［6，7］. 已经知道AR基因CAG STR异常与雄激素不敏感征和延髓脊髓性肌萎缩有关［8，9］，并影响对前列腺癌［10］、肝细胞癌［11］、乳腺癌［12］、卵巢癌［13］、子宫内膜癌［14］以及子宫肌瘤的易感性［15］. 到目前为止，文献中少见有关这一多态性位点与膀胱尿路上皮肿瘤发生或发展关系的报道. 此研究对陕西地区人群的AR编码基因中的CAG STR长度与男性膀胱癌之间的关系进行了探讨。 1材料和方法 材料 95例男性膀胱癌和94例男性阑尾炎石蜡包埋的标本来自第四军医大学唐都医院病理科. 膀胱组年龄为17~84岁，中位数年龄为63岁；均为尿路移性上皮癌，其中病理分级Ⅰ级20例，Ⅱ级55例，Ⅲ级20例。 方法 μm切片5张经二甲苯脱蜡及乙醇冲洗后，应用常规酚氯仿法进行基因组DNA的抽提，用紫外分光光度计（Eppendorf， 232 C， City name， Germany）确定DNA浓度。 (221+): 5′GAGGAGCTTTCCAGAATCTG3′；AR1B (454-): 5′CATGGGCTTGGGGAGA3′；AR2A (230+): 5′TCCAGAATCTGTTCCAGAGC3′；AR2B (446-): 5′TGGGGAGAACCATCCTCACC3′. DNA参见以前的方法［16，17］进行扩增。 、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及数据记录按以前的方法［16，17］，琼脂糖凝胶电泳显示扩增效果，扩增成功进行变性聚丙烯酰胺凝胶（AmehamPharmacia Biotech）进行长胶分离28 h（150 V）. 进行凝胶银染，分别用UVP凝胶分析系统和光学照相记录数据。 ，我们选取3例不同的扩增产物应用Sanger法［18］进行测序. 结合测序结果及10 bp DNA分子量标志物做产物泳动位置的对照，按以前的方法［15］确定每例标本的CAGn的n值. 为了明确数据的可靠性，上述反应都经过至少一次重复证实。 统计学处理：应用SPSS 统计软件包的单因素方差分析对男性膀胱癌和阑尾炎的CAG STR长度进行比较，判断两者之间的关系，P为有统计学意义。 2结果 基因CAG STR n值的测定共对95例膀胱癌和94例阑尾炎（对照组）标本的AR基因第一外显子CAG STR长度进行了测定. 对其中3例不同标本测序，以确定此实验的可靠性. 测序结果如下：显示1例泳动度为202 bp左右扩增产物的测序结果，显示CAG STR n值为14，与以前的测定结果［19］一致。 电泳显示，对照组所有标本均显示出单一条带（Fig 1），而膀胱癌标本中有6例（%）出现额外条带（Fig 2），为微卫星不稳定性（microsatellite itability， MSI）［19］表现. 这6例标本中，5例成功地分离到癌组织和癌旁组