转录组测序及ESTSSR引物开发.pptxVIP

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  • 2022-06-06 发布于上海
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会计学;种子无菌苗的制备;2.培养基配置(MS或1/2MS,控制好PH值) 3.无菌苗培育(丛生芽诱导、丛生芽增殖) 先暗培养,种子发芽后进行光照培养 样品需求量(单次):≥20ug ;样品浓度≥ 250ng/uL ;EST-SSR引物开发; EST:Expressed Sequence Tags,即表达序列标签,指从 cDNA 文库中随机挑取单克隆测序所获得的序列片段,序列长度一般约为 60-500bp,由于 cDNA 的 5’端或 3’端的有限序列可特异性地代表一个基因,故称为“表达序列标签”。 特点:EST作为表达基因所在区域的分子标签,因编码 DNA 序列高度保守而具有自身的特殊性质,与来自非表达序列的标记(如RAPD、SSR、AFLP 等)相比,更有可能突破家系与种的限制。因此,EST 标记在亲缘关系较远的物种间具有更重要的意义。 ; (1)转录组序列SSR位点的查找与引物设计; (2)SSR标记引物的设计和评价; (3)SSR-PCR反应体系的优化和引物筛选; (4)进行遗传多样性和群体遗传学分析; ;;EST-SSR 标记技术在植物学研究中的应用 ;谢谢大家

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