仪器分析液相色谱法.pptxVIP

仪器分析液相色谱法; 1、高效液相色谱法与经典液相色谱法 ;2、高效液相色谱法与气相色谱法 ; (3)气相色谱一般都在较高温度下进行的,而高效液相色谱法则经常可在室温条件下工作。 总之,高效液相色谱法是吸取了气相色谱与经典液相色谱优点,并用现代化手段加以改进,因此得到迅猛的发展。目前高效液相色谱法已被广泛应用于分析对生物学和医药上有重大意义的大分子物质,例如蛋白质、核酸、氨基酸、多糖类、植物色素、高聚物、染料及药物等物质的分离和分析。 高效液相色谱法的仪器设备费用昂贵,操作严格,这是它的主要缺点。 ;HPLC仪器;HPLC和经典LC;HPLC仪器组成;HPLC——高压输液系统;HPLC——进样装置;HPLC——分离柱;HPLC——检测器Detector; 在液相色谱中,有两种基本类型的检测器。一类是溶质性检测器,它仅对被分离组分的物理或化学特性有响应,属于这类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器等。另一类是总体检测器,它对试样和洗脱液总的物理或化学性质有响应,属于这类检测器的有示差折光,电导检测器等。;HPLC——UV detector;HPLC——Fluorescence Detector;HPLC——示差折光检测器;HPLC——其他检测器;HPLC中的固定相和流动相;Stationary phase 固定相;Mobile phase 流动相;Mobile phase 流动相;HPLC的主要类型和原理;主要类型;一、液固吸附色谱(LSAC);LSAC——固定相;LSAC——流动相;二、液液分配色谱(LLPC);LLPC——固定相;LLPC——流动相;三、化学键合相色谱法(CBPC);CBPC——固定相的制备;CBPC——固定相的制备;CBPC——正相键合相色谱法 ;CBPC——反相键合相色谱法 ;四、尺寸排阻色谱法(SEC);SEC——分离原理(分子筛效应);SEC——固定相;SEC——流动相;五、亲和色谱法(AC);六、离子色谱法(IC);IC——分类;IC仪器的基本构成;各种液相色谱法的比较;HPLC条件和类型的选择;影响HPLC分离效果的因素;影响HPLC分离效果的因素;分离类型的选择 ;2、依照溶解度选择 弄清样品在水、异辛烷、苯、四氯化碳、异丙醇中的溶解度是特别有用的。假如样品可溶于水井属于能离解物质,以采纳离子交换色谱为佳;如样品可溶于烃类(如苯或异辛烷),则可采用液一固吸附色谱;如样品溶解于四氯化碳,则多采纳常规的分配和吸附色谱分离;如样品既溶于水又溶于异丙醇时,常用水和异丙醇的混合液作液一液分配色谱的流动相,以憎水性化合物作固定相。 ;3、依照分子结构选择 用红外光谱法,可预先简单地判断样品中存在什么官能团。然后,确定采纳什么方法合适。例如,酸、碱化合物用离子交换色谱;脂肪族或芳香族用液一液分配色谱、液一固吸附色谱;异构体用液一固吸附色谱;同系物不同官能团及强氢键的用液一液分配色谱。;HPLC分离类型选择;HPLC的应用 ;2、 稠环芳烃的分析;超临界流体色谱法(SFC);超临界流体色谱法 ;一、超临界流体的特性 ; ;(2)超临界流体的特性 超临界流体具有关于分离极其有利的物理性质。它们的这些性质恰好介于气体和液体之间。超临界流体的扩散系数和粘度接近于气相色谱,因此溶质的传质阻力小,能够获得快速高效分离。另一方面,其密度与液相色谱类似,如此就便于在较低温度下分离和分析热不稳定性、相对分子质量大的物质。另外,超临界流体的物理性质和化学性质,如扩散、粘度和溶剂力等,都是密度的函数。因此,只要改变流体的密度,就能够改变流体的性质,从类似气体到类似液体,无需通过气液平衡曲线。超临界流体色谱中的程序升密度相当于气相色谱中程序升温度和液相色谱中的梯度淋洗。 通常作为超临界流体色谱流动相的一些物质,其物理性质列在表20-1中。 ;二、超临界流体色谱仪 ;1、Berger p7500超临界流体色谱仪;2、流程图;3、压力效应;程序升压与等压谱图比较;4、固定相和流动相;5、检测器;三、超临界流体色谱法与其他色谱法比较;感谢您的聆听！