酶工程生物技术.pptVIP

酶工程;生物技术的四大支柱;酶的基础知识;一 什么是酶？;二 酶催化特性;三 酶的化学本质;四 酶的组成;五 酶的命名与分类;（一）国际系统分类法;（二）系统命名法;11;12;酶工程;酶工程;酶工程的应用范围;尽管人类19世纪前后才建立起酶的概念，但酶的催化作用却很早就为人们的生活所利用。比如： (1)在人类游牧生活时期，就已会利用动物的胃液来凝固牛乳 ； (2)人类在4000多年前就已掌握的酿酒和制酱技术其实也是酶作用的结果。 ;放线菌 1987年以后，Bucher发现酶的细胞外作用现象，从而???致了酶的商品化生产。;霉菌 最初的商品酶制剂主要以动植物为原料提取，如从牛胃中提取凝乳酶、从胰脏中提取胰酶、从血液中提取凝血酶、从植物材料中提取淀粉酶等。 之后，Takamine利用霉菌来生产淀粉酶使得酶制剂工业取得突破，其方法至今仍被采用; 第二次世界大战以后，随着微生物培养技术、发酵工业和设备的渐渐完善，利用微生物来获得商品化酶制剂已形成规模化产业，并开辟了广阔的市场。 ;Pilot Biostat UD50; 20世纪90年代，随着基因工程的广泛介入，一些原来只能由动物或植物生产的酶，经过酶基因重组，可以在微生物上表达。由于在发酵过程中很容易对微生物进行控制，因此 “基因工程＋发酵工艺＋先进的发酵设备”可以算是酶工业的第三次飞跃。 ;微生物酶的开发;微生物酶的开发;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;微生物酶开发的一般程序;代谢流分析与控制;谷氨酸棒杆菌产生谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、脯氨酸代谢网络图;氧化酶诱导产酶机制和发酵动力学研究;实验室工作与工业化生产之间的差异;微生物酶的应用;一、蛋白酶;洗毛工艺中蛋白酶的应用;控制蛋白酶治疗疾病;二、淀粉酶;三、纤维素酶;四、脂肪酶;五、医药生产用酶青霉素酰化酶;六、特殊的治疗用酶;谢谢;固定化酶 ——固定化技术及应用 ;什么是固定化酶？;化学偶联;固定化酶的特点：;固定化技术;一 固定化酶的方法;55; 相分离法 酶 硝酸纤维素 ?－D－半乳糖苷酶 天门冬酰胺酶 火棉胶 醇脱氢酶 苹果酸脱氢酶 丙酮酸激酶 脲酶 界面聚合法 尼龙 液膜法 聚脲 液体干燥法 乙基纤维素 聚苯乙烯;（二）吸附法;优点： 固定化时酶分子的构象很少 或基本不发生变化。 缺点： 结合力弱，易解吸附。 载体： 纤维素、琼脂糖、活性炭、 沸石及硅胶等。;离子结合法 酶分子 含有离子交换基团的固相载体 第一个离子结合法固定化酶： DEAE — Cellulose 固定化过氧化氢酶 第一个工业化的固定化酶： DEAE-Sephadex A-50 固定化氨基酰化酶 ;（三）胶格包埋法;（四）共价交联法;图 7－11 酶分子之间共价交联和与水不溶性载体共价偶联 酶分子；（a）酶分子之间用双功能基团的化学交联试剂相互交联成水不溶性的固定化酶；（b）酶分子被偶联到水不溶性载体上形成水不溶性的固定化酶;表7－2 常用于固定化酶的交联剂 交联剂 参考文献 戊二醛 13－16 二重氮联苯胺－2，2‘－二磺酸 17，18 4，4‘－二氟－3，3’－二硝基二苯砜 19 二苯基－4，4‘－二硫氰酸－2，2’－二磺酸 20 1，5－二氟－2，4－二硝基苯 21 酚－2，4－二磺酰氯 22 3－甲氧基二苯基甲烷－4，4‘－二异氰酸盐 23 ;（五）共价偶联法;65;66;67;68;二 固定化酶在工业生产上的应用;泵;三 固定化酶在医学上的应用;葡萄糖＋醌＋H2O 葡萄糖酸＋氢醌;（2）脲电极;四 固定化酶在基础研究中的应用;表7－3 固定化肌酸激酶及固定化亚基的蛋白质含量及比活力 酶的衍生物 蛋白质含量 比活力 （?g/ml 凝胶）（％） （单位/mg) 衍生物A 400 100 28.0 衍生物B 210 52.5 25.7 衍生物C 380 95.0 27.4