分子生物学方法鉴定微生物.ppt

微生物分子生物学鉴定;微生物的鉴定;类别;一、DNA的碱基组成(G+C)mol% (G+C)mol%= ;通过核酸分析鉴定微生物遗传型 生物GC比的特点 ①亲缘关系相近的种，其GC比也相近；反之，GC比相近的两个种，它们的亲缘关系则不一定都很接近。 ②GC比差距很大的两个种，其亲缘关系必然较远。 ③GC比是建立新分类单元时的可靠指标 GC比相差2%时，没有分类学上的意义； GC比相差在2.5%～4.0%时，为同一种的不同菌株； GC比相差5%时，为不同种； GC比相差10%时，为不同属。;测定DNA碱基组成的方法： 由于热变性温度法操作简单、重复性好而最为常用。 基本原理：将DNA加热，两条单链逐渐被打开，从而使DNA溶液260nm紫外吸收明显增加，称DNA的增色效应。G+C％增加，所需温度也较高，当温度高达一定值时，DNA完全分离成单链，此后紫外吸收不再增加。 DNA的热变性过程(即增色效应的出现)是在一个狭窄的温度范围内发生的，紫外吸收增加的中点值所对应的温度称为该DNA的热变性温度(Tm)。在一定条件下，DNA的Tm值与DNA的G+Cmol%成正比。 Tm＝69.3＋0.41（G+Cmol）％;;二、核酸分子杂交; 核酸的分子杂交 ① DNA-DNA杂交 基本原理：双链DNA分