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实验一 常见显微镜的使用、细胞形态结构观察及大小测定 (实验报告) 一、实验目的 1、掌握几种常见显微镜的使用方法 2、观察几种细胞的形态结构 3、掌握用测微尺测定细胞大小的原理和方法 二、实验原理 1、细胞的形态、结构与功能相关是很多细胞的共同特点，在分化程度较高的细胞更为明显。 2、测微尺分物镜测微尺（简称物微尺或台微尺）和目镜测微尺（简称目微尺），两者 配合使用，可以测量细胞大小。目微尺是一个可以放在目镜内的特制玻璃圆片，圆片中央刻 有一条直线，此线分为若干格。物微尺为一载玻片中央封固的小尺，长1mm，被等分为 100 格，长为 0.01mm(10μm)。当测量细胞大小时，不能用物微尺直接测量细胞，而只能使用目微尺。因目微尺测量的细胞是经物镜放大后的像，而它每格所代表的实际长度随物镜的放大 率而变，在测量时需要先用物微尺来标定，求出某一放大率时目微尺每格所代表的实际长度， 然后再用以测定细胞大小。 将物微尺放在显微镜的载物台上，小心转动目镜测微尺，移动物微尺使两尺平行，起点线重合，然后找出另一处两尺刻度重合处，记录起点线到重合线之间的各尺的刻度数（格数），按下式计算，在该放大系统下目微尺每格所代表的实际长度： 物微尺格数 目微尺每格所代表的实际长度= ×10μm 目微尺格数 例如：目微尺是100 格，其对应的物微尺是80 格，则目微尺每格所代表的实际长度为80/100×10=8μm。 测量某一细胞时，如果目微尺测得其横径为5 格，则此细胞横径为 8×5=40μm。三、实验用品 (一)材料 酵母；大肠杆菌；蛙血细胞； 洋葱表皮细胞；洋葱根尖细胞；兔肝细胞切片；百合花 药切片。 (二)器材 普通光学显微镜、倒置荧光显微镜、物微尺、目微尺 (三)试剂 香柏油、二甲苯四、方法步骤 （一）几种常见显微镜的使用方法1、普通光学显微镜 使用方法 图像采集 2、倒置荧光显微镜 使用方法 图像采集 （二）细胞形态结构的观察 1、细胞形态结构的观察 大肠杆菌、酵母、蛙血细胞、洋葱表皮细胞 2、细胞核、核仁的观察 洋葱根尖细胞、兔肝细胞切片 3、多核及多核仁的观察百合花药切片 （三）细胞大小的测定 1、将目微尺放于目镜内 2、将物微尺放在显微镜的载物台上 3、小心转动目镜测微尺，移动物微尺使两尺平行，起点线重合，然后找出另一处两尺刻度重合处 4、记录起点线到重合线之间的各尺的刻度数（格数），按下式计算，在该放大系统下目微尺每格所代表的实际长度： 物微尺格数 目微尺每格所代表的实际长度= × 10μm 目微尺格数 5、将制作的各种细胞临时装片置于载物台上，测定细胞的大小（包括长径和短径）。五、注意事项 1、用物微尺标定的目微尺每格长度的数值代表在某一放大系统下的情况，这一数值会随物镜的放大率而改变，因此，在什么放大倍数物镜下标定的目微尺只能在同一放大倍数的物镜下测定细胞的大小。 2、使用油镜时，滴加 1-2 滴香柏油，观察结束后，一定要用二甲苯将镜头、装片擦拭干净。 六、作业 1、分别计算出使用 10×、40×、100×物镜时，目微尺每格代表的实际长度。 90 10X 目微尺每格所代表的实际= × 10μm=9μm 100 1 40X 目微尺每格所代表的实际= × 10μm=2.5μm 4 9 40X 目微尺每格所代表的实际= × 10μm=0.9μm 95 2、绘出你所观察到的洋葱表皮细胞图，指出各部分的名称。 3、列表说明你所测出的几种细胞的形态、结构特征及大小。 细胞长径 细胞短径 形态、 目镜 目镜物镜 细胞名称 结构 测微 测微放大 特征 尺格 尺格 倍数 目镜 目镜 目镜 目镜 测微 细胞大 物镜 测微 测微 测微 尺平 小（μ 放大 尺格 尺格 尺格 均格 m） 倍数 目镜 目镜 细胞 测微 测微 大小 尺平 尺格 （μ 均格 数数100X2.52.01.82.11.9100X0.70.50.60.60.5数 数 数 100X 2.5 2.0 1.8 2.1 1.9 100X 0.7 0.5 0.6 0.6 0.5 成杆状,形体微 小,没 大肠杆菌 有芽 体 多数呈球型,有 酵 母 芽 体 , 细胞壁较明显  40X 4.5 3.8 1.7 3.3 8.3 40X 1.1 1.0 1.2 1.1 2.8 呈椭 呈椭 蛙血细胞 圆状, 球状个体较大且排列紧密,长 条状, 液泡明显 11.5 10.5 26.3 40X 6.2 7.2 7.0 6.8 17 洋葱表皮 细胞 40.3 67.1 167.8 40X 27.8 22.3 21.9 2.4 60 40X 10.8 9.3 40X 82.5 78.5