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链霉亲和素科普Amyjet:链霉亲和素是什么?链霉亲和素相关实验工具及用途
一、链霉亲和素是什么?
首要我们要弄清楚链霉亲和素究竟是什么。链(霉)亲和素streptavidin又称链 霉抗生物素蛋白,是由链霉菌streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质,分子 量为65kD。链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成,其氨基酸组成中,甘氨酸 和丙氨酸的含量较大,而且结合生物素的活性基因也是肽链中的色氨酸残基;链 霉亲和素是一种稍偏酸性(pH6.0)的蛋白质,并且不带很合糖基。
二、链霉亲和素的来源链霉亲和素Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物,主要通过2 一 亚氨基生物索亲和层析法提纯,1L培养液中含蛋白10至60mg。链霉亲和素是四 聚体蛋白,大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素 结合,两者之间的亲和力极为强烈。
三、链霉亲和素与亲和素的比拟相同点:1、生物素结合能力:AV: 1315u, SA: iri8U
2、活性中心依赖于色氨酸-懒氨酸:亲和素在氨基酸序列的70-70和110-H1 两个位点有色氨酸-懒氨酸,链霉亲和素在氨基酸序列的79-80和120-121两个 位点含有色氨酸-懒氨酸。
不同点:1、分子量:AV-66KD, SA=54KD;2、等电点:AV=10.5, SA=6.0, AV带正电较多,非特异性结合较强。
3、位阻效应:SA的生物素结合位点较AV深,位阻效应较强,长臂生物素更适 合。
4、生物素的结合:AV随机结合,SA协同结合。
5、氨基酸序列:AV含二硫键和10%糖,SA含甘氨酸丙氨酸较多,无糖和二硫键。 四、链霉亲和素相关实验工具介绍
“2 GM
名称:艾美捷Jackson链霉亲和素(Streptavidin)编号:016-000-114
物理状态:冻干固体类别:链霉亲和素和偶联物
用途:艾美捷Jackson链霉亲和素可应用于酶联免疫、免疫组化、流失分析、原 位杂交以及斑点杂交等试验。
特点:艾美捷Jackson链霉亲和素能与Biotin标记的各种亲和纯化二抗或者 Biotin标记的色谱级蛋白联用进行各种免疫检测,同时该链霉亲和素与亲和素 相比更容易穿透组织并且分子结构更小,使用起来也更加稳定和灵敏。
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