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大鼠颅脑损伤后巢蛋白变化的实验研究（医疗卫生论文资料） 文档信息 ： 文档作为关于“医学心理学”中“神经内外科”的参考范文，为解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容素材摘取等相关工作提供支持。正文4124字，doc格式，可编辑。质优实惠，欢迎下载！ 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：大鼠颅脑损伤后巢蛋白变化的实验研究 1 1 材料与方法 2 2 结果 3 3 讨论 4 文2：颅脑损伤后低血钠症的诊治 5 参考文摘引言： 7 原创性声明（模板） 8 文章致谢（模板） 8 正文 大鼠颅脑损伤后巢蛋白变化的实验研究（医疗卫生论文资料） 文1：大鼠颅脑损伤后巢蛋白变化的实验研究 基金项目：吉林省科技厅国际合作项目(-1);吉林大学重大创新基金 巢蛋白(nestin)与颅脑损伤、修复关系的研究已成为神经外科的热点〔1〕。外伤后原发性脑损伤的主要病理改变是神经元和胶质细胞的坏死。而nestin的表达与神经系统修复关系密切〔2〕。脑损伤后脑组织可表达多种活性物质，这些物质的改变可以用来推断脑损伤经过时间〔3〕。本研究在颅脑外伤后细胞中nestin的表达变化及不同时间颅脑损伤后nestin阳性细胞比较，旨在分析nestin与颅脑损伤的关系，为颅脑损伤后不同时间nestin的表达研究提供依据。 1 材料与方法 动物分组 SD大鼠95只，雄性，体重300～350 g，由吉林大学白求恩基础医学部实验动物中心提供。随机分为正常对照组(5只)和损伤组(90只)。损伤组按冲击时脑组织所承受力量大小分为轻(100 kPa)中(200 kPa)重(300 kPa)3个亚组，各组在损伤后3、6、24、72 h、1、2 w采集标本，重度损伤组5只大鼠在击后10 min之内死亡，未记入损伤组内。 模型制备 SD大鼠全麻(速眠新 mg后腿肌肉注射)后置于脑立体定位仪上，沿头皮矢状缝正中切开，暴露颅骨。在正中矢状钱左侧 mm，人字缝后 mm处钻一直径为3 mm的小孔，保护硬脑膜完整，将液压冲击接头用牙托树脂固定在颅骨小孔，孔周围密闭，待树脂凝固后将其连至液压打击装置。以不同压力冲击左侧顶叶皮质造成液压冲击脑损伤。 标本采集 各组大鼠在液压冲击脑损伤后3、6、24、72 h、1、2 w，应用速眼新 mg后腿肌肉注射麻醉，四肢固定于手术板上，无菌条件下，切开胸腔后暴露心脏，以穿刺针穿至左心室，并切开右心房，以%肝素生理盐水灌洗，至灌流出液体清亮为止，然后以4%多聚甲醛液灌注，约5～6 min后大鼠出现四肢抖动、强直、头向后仰、似角弓反张样，迅速断头取脑。将脑组织置于4%多聚甲醛溶液中固定12 h后石蜡包理，并于损伤周边区前后皮质区行连续切片(厚5 μm)后置于4℃冰箱中保存以备试验。 观察项目 各组每例标本取同一部位石蜡切片2张，石蜡切片常规脱蜡至水;3%H2O2灭活内源性过氧化物酶;PBS冲洗;抗原修复;PBS冲洗;正常血清封闭。一抗，4℃过夜;PBS冲洗;二抗，37℃ 30 min;PBS冲洗。DAB显色后水洗;苏木素复染，脱水、透明封片。 图像分析 应用IPP显微图像分析系统进行分析，置于400倍光镜下观察。在每张nestin免疫组织化学染色切片中，于损伤侧顶叶皮层取5个视野，在IPP高清晰度彩色医学图像分析系统下，测量nestin阳性细胞的平均光密度(AOD)值。采用统计学软件对实验数据进行单因素方差分析。 统计学分析 所得数值以x±s来表示，采用统计软件包分析，两组均数比较用t检验，多组均数比较在确定方差分析齐性后进行q检验。 2 结果 光镜下观察nestin阳性细胞细胞核呈棕色。轻、中、重损伤组各时间点阳性细胞数高于正常对照组(P)。损伤后3 h损伤侧顶叶皮层、海马齿状回及胼胝体区开始出现nestin阳性细胞，随后逐渐增加，1 w后nestin阳性细胞数达到高峰，之后nestin阳性细胞数逐渐下降，2 w时明显低于1 w，但高于正常水平(见表1) 表1 各组不同时间颅脑损伤后nestin阳性细胞比较(略) 与正常对照组比较：1)P 3 讨论 随着现代社会日益工业化和交通的发展，我国颅脑创伤的发生率也明显增多。颅脑受外力严重打击下，造成颅骨骨折、脑挫裂伤、颅内血肿，继而发生一系列病理变化〔4〕。损伤周边区神经细胞的恢复情况直接影响病人预后。 Nestin是一种胚胎时期表达的第Ⅵ类中间丝蛋白，主要存在于胚胎时期的中枢神经系统〔5〕，胚胎晚期随着干细胞的分化成熟逐渐被胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经丝蛋白(NF)等中间丝蛋白代替。正常成年哺乳动物脑内nestin阳性神经前体/干细胞仅存在于侧脑室的室管膜下区(SVZ区)和海马齿状回颗粒下层(SGZ区)〔6〕。SV