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格尔德霉素对肝细胞生长因子引起的人脑胶质瘤细胞增殖与凋亡变化的影响(医疗卫生论文资料)
文档信息
:
文档作为关于“医学心理学”中“神经内外科”的参考范文,为解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容素材摘取等相关工作提供支持。正文6078字,doc格式,可编辑。质优实惠,欢迎下载!
目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:格尔德霉素对肝细胞生长因子引起的人脑胶质瘤细胞增殖与凋亡变化的影响 2
1 材料与方法 2
2 结果 3
3 讨论 4
文2:血管内皮细胞生长因子对骨缺损修复的影响 5
1 材料与方法 6
2 结果 7
3 讨论 7
参考文摘引言: 8
原创性声明(模板) 9
文章致谢(模板) 10
正文
格尔德霉素对肝细胞生长因子引起的人脑胶质瘤细胞增殖与凋亡变化的影响(医疗卫生论文资料)
文1:格尔德霉素对肝细胞生长因子引起的人脑胶质瘤细胞增殖与凋亡变化的影响
脑胶质瘤是神经外科难治疾患之一,发病率较高,预后极差,尽管目前治疗方法有许多种,但疗效都欠佳。近年来研究发现肝细胞因子(HGF)能以自分泌和旁分泌方式促进神经胶质瘤细胞的增殖,并增强其侵袭能力〔1〕,HGF及其受体Met系统作为迁移和侵袭的关键刺激因子,在脑胶质瘤的进展中具有决定性作用。抗肿瘤抗生素格尔德霉素(geldanamycin,GDM)对HGF的抑制效力最显著,是HGF最强的抑制物〔2,3〕。本研究旨在探讨GDM对HGF引起的胶质瘤细胞增殖、周期和凋亡的影响,为临床开展脑胶质瘤治疗提供新的思路。
1 材料与方法
细胞培养及实验分组 人脑恶性胶质瘤细胞系U251-MG和U87-MG(吉林省肿瘤研究所提供),用含青、链霉素的DMEM+10%FBS培养,37℃,5%CO2饱和湿度条件下,每2~3 d消化传代,细胞同步生长后,用HGF(终浓度30 ng/ml)作用24 h后,再加入不同剂量GDM(终浓度50、250,500与1 000 nmol/L)再处理48 h,进行细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡检测。实验分组:正常组、单纯HGF、单纯GDM和HGF+GDM组。rhHGF为美国Calbiochem公司产品,GDM用其衍生物17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin (17-AAG),MTT、二甲基亚砜(DMSO)和PI均购自Sigma公司。
细胞周期检测 收集对数生长期U251-MG和U87-MG细胞,调细胞浓度为1×105个/ml,接种于24孔培养板中,经HGF作用24 h后,按实验分组加入不同浓度GDM,继续培养48 h后,收集细胞,1 200 min,离心5 min, mol/L PBS洗两次,RNA酶消化,PI 4℃避光染色30 min,用流式细胞仪(美国,BD公司)检测细胞周期时相和凋亡变化。
细胞增殖能力检测 收集对数生长期U251-MG和U87-MG细胞,接种于96孔培养板内,细胞数为2×104个/孔,加入HGF作用24 h,加入不同浓度GDM作用48 h后,加入MTT(5 mg/ml)20 μl 继续培养4 h。培养结束后吸弃孔内培养液,加入DMSO 150 μl/孔,振荡混匀10 min,应用酶标仪(Bio-Rad,美国),于570 nm波长测定A值,各组设6复孔。
统计学分析 数据以x±s表示,应用SPSS 软件包进行方差分析。
2 结果
U251-MG细胞周期与凋亡变化 与正常对照组相比,30 ng/ml的HGF作用24 h后,U251-MG细胞G0/G1期细胞百分率显著增加(P
U87-MG细胞周期与凋亡变化 30 ng/ml HGF作用24 h后,U87-MG细胞G0/G1期缩短,而G2/M和S期延长,凋亡细胞较正常组减少(P
U251-MG细胞增殖变化 30 ng/ml的HGF作用24 h后,U251-MG细胞增殖能力显著增强(P
U87-MG细胞增殖变化 30 ng/ml的HGF作用24 h后,U87-MG细胞增殖能力较正常组显著增加(P
表1 各组U251-MG和U87-MG细胞在不同细胞周期细胞百分率和凋亡率变化(略)
与正常组比较:1)P
图1 各组细胞周期和凋亡流式细胞图结果(略)
表2 各组U251-MG 和U87-MG 细胞吸收率A值的MTT分析结果(略)
3 讨论
HGF能刺激多种类型细胞分化、增殖、运动、迁移及形态发生,是一种多功能的细胞因子。许多肿瘤均有HGF及其受体c-Met的过表达,如,胰腺癌、肺癌、脑胶质瘤、黑色素瘤、乳腺癌、甲状腺癌、淋巴瘤及多发性骨髓瘤等。
目前已有大量研究显示, HGF及c-Met(HGF-Met系统)在脑胶质瘤的发生发展中具有重要促进作用,提
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