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TNP470对Wistar大鼠C6胶质瘤细胞抑制作用的体内实验研究（医疗卫生论文资料） 文档信息 ： 文档作为关于“医学心理学”中“临床医学”的参考范文，为解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容素材摘取等相关工作提供支持。正文9486字，doc格式，可编辑。质优实惠，欢迎下载！ 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：TNP470对Wistar大鼠C6胶质瘤细胞抑制作用的体内实验研究 2 1 材料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 5 文2：放线菌素D和VM26对大鼠胶质瘤细胞增殖的影响的体内实验研究 6 1 材料与方法 7 2 结果 9 3 讨论 11 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 15 文章致谢（模板） 15 正文 TNP470对Wistar大鼠C6胶质瘤细胞抑制作用的体内实验研究（医疗卫生论文资料） 文1：TNP470对Wistar大鼠C6胶质瘤细胞抑制作用的体内实验研究 胶质瘤是神经系统最常见的一种恶性肿瘤，呈浸润性生长，与正常脑组织无明显分界，手术难以彻底切除，因此术后进行放化疗及免疫治疗显得尤为重要〔1〕。近年来研究表明，肿瘤的生长和转移与其新生血管形成有密切关系。作为抗肿瘤治疗的新方向，血管生成抑制剂受到越来越多的关注，尤其具有高效低毒特性的血管生成抑制剂更被认为是目前最有发展前途的抗肿瘤药物〔2〕。本研究通过研究TNP-470对大鼠C6胶质瘤细胞的抑制作用，旨在探讨其对胶质瘤的抑制效应。 1 材料与方法 动物 健康雌性Wistar大鼠60只，鼠龄5～ 6 w，体重160～180 g，购于吉林大学实验动物中心。 方法 试剂、仪器与药品 TNP-470〔0-(氯乙酰-氨甲酰基)烟曲霉醇〕、 AGM-1470购于长春市天诚医药公司;顺铂购自齐鲁制药厂;IMDM培养液购自美国Gibco公司。 细胞株培养 大鼠C6脑胶质瘤细胞株由吉林大学基础医学院生理教研室提供。置37℃、5% CO2孵箱中传代培养。将C6大鼠脑胶质瘤细胞株复苏成功后，用含10%胎牛血清的IMDM培养液培养(含100 U/ml青霉素和链霉素)，当细胞增殖进入对数阶段，用%胰酶消化细胞并制成细胞悬液。细胞活力以台盼蓝排斥试验检测。 动物荷瘤模型的建立 收集对数生长期生长状态良好的C6细胞(调细胞浓度为×106/ml，细胞存活率达90%以上)，以5×106个细胞/鼠的量接种，所有的大鼠均注入右前腋皮下，注入量不超过 ml培养液，以防止注入过多外溢。 给药方法 荷瘤后将全部Wistar大鼠随机分为4组，每组15只，第3天开始药物治疗。具体如下：① 肿瘤对照组：%氯化钠注射液(30 mg/kg)，隔日1次，共6次，皮下注射。② TNP-470组：TNP-470(30 mg/kg)，隔日1次，共6次，皮下注射。③ 顺铂组：顺铂(5 mg/kg)，2次/w，共4次，腹腔内注射。④ 联合给药组：TNP-470以15 mg/kg隔日皮下注射1次，共6次;同时给予顺铂 mg/kg腹腔内注射，2次/w，共4次。 TNP-470对肿瘤生长的影响 在药物治疗期间，通过测量肿瘤最大横径观察肿瘤的生长情况，同时观察大鼠对药物的毒副反应情况。 TNP-470对肿瘤细胞凋亡及细胞周期的影响 肿瘤移植2 w后停药，断头处死动物，立即取出肿瘤组织，测量肿瘤横径、称量其重量。取部分肿瘤组织研磨成单细胞悬液，计数后将细胞终浓度调成1×107个细胞/ml，取2×106个细胞，快速加入5 ml 70%冷乙醇于4℃下固定12 h以上，用于增加细胞膜的通透性。然后用PBS洗涤细胞，1 500 min离心5 min，重复2次后加入 mg/ml的PI(碘化丙锭)400 μl， mg/ml的RNA酶100 μl，避光反应30 min后直接上机，每份样品检测1×104/ml个细胞。采用美国COULER公司生产的ELITE型流式细胞仪，激发光源为15 mw氩离子激光，波长488 nm，应用FACS软件，收集细胞，LYSIS软件分析处理资料，用累积曲线分割法计算其细胞所占比例，记录细胞周期和凋亡百分率。 肿瘤血管密度、细胞凋亡观察 断头处死动物取部分组织置于10%福尔马林中固定，经系列酒精脱水，二甲醛透明后进行石蜡包埋，切片，厚5 μm，60℃2 h后备用。将组织切片经二甲醛脱蜡，系列酒精脱水后苏木精染色，盐酸酒精分色后，浸入伊红染液中，蒸馏水冲洗后，系列脱水，二甲苯透明封片。HE染色，光镜下观察肿瘤血管密度、电镜下观察细胞凋亡。 统计学分析 数据以x±s表示，组间比较采用Student′s t检验。 2 结果 TNP-470对大鼠一般状态的影响 联合给药组大鼠体重较对照组明显下降