HPLC法测定黔产钩藤中钩藤碱及异钩藤碱含量（职称论文资料）.docVIP

HPLC法测定黔产钩藤中钩藤碱及异钩藤碱含量（职称论文资料） 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：HPLC法测定黔产钩藤中钩藤碱及异钩藤碱含量 1 1 仪器与试药 2 2 方法与结果 2 3 讨论 5 文2：反相HPLC法测定大鼠组织中异钩藤碱含量 5 1 仪器与试药 6 2 方法与结果 6 3 讨论 8 参考文摘引言： 9 原创性声明（模板） 10 文章致谢（模板） 10 正文 HPLC法测定黔产钩藤中钩藤碱及异钩藤碱含量（职称论文资料） 文1：HPLC法测定黔产钩藤中钩藤碱及异钩藤碱含量 贵州道地药材钩藤，为茜草科茜草属钩藤的干燥带钩枝茎。作为常用的中药材之一，具有清热平肝，熄风定惊的作用。主要用于头痛眩晕、感冒夹惊、惊痫抽搐、妊娠子痫，以及高血压等症。现代研究表明，钩藤的主要有效成分是总生物碱，其中以钩藤碱与异钩藤碱为主，具有降血压、抗心律失常以及抗血小板聚集和抗血栓形成的作用，目前，随着医药科技的发展，由于钩藤的深入开发研究，钩藤的功能效用在不断扩大，己越来越受到人们关注。由于钩藤的临床应用极为广泛，现有较多的制剂使用钩藤作为主要原料药材。因此，利用钩藤制成的具有降血压、抗心律失常等治疗各种病症的复方制剂较多，如潜阳降压胶囊、天钩灵胶囊等，特别是进几年来利用钩藤提取制成的钩藤碱静脉注射液，具有抗脑血栓的作用。目前评价钩藤质量优劣的标准，多以钩藤碱和异钩藤碱的含量为指标。因此，我们采用合适、简便的方法提取钩藤中的钩藤碱与异钩藤碱，并采用快速、准确的RP-HPLC法测定其含量，有助于黔产钩藤药材的质量控制。 1 仪器与试药 高效液相色谱仪；美国WaTe2996 Separatnms Madule photodiode Arroy Detebo 高效液相自动进样及分离系统;Wate 2996二极管阵列；检测器紫外检测器 Empowrer色谱数据工作战；KQ-500D A型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），实验所使用试剂试药均为分析纯。钩藤碱(纯度为98% )和异钩藤碱(纯度为98% )对照品购自上海原叶生物科技有限公司（批号-2011）。所用钩藤药材均由贵州省昌昊中药发展有限公司提供（剑河、榕江、锦屏、黎菠等）不同产地。 2 方法与结果 色谱条件与系统适用性试验色谱柱：十八烷基键和硅胶为填冲剂； KromosilC18柱( mnl×250 mm，5 m)， 以甲醇-%氨水溶液(65：35)为流动相； 流速：?min-1；柱温：35℃ ：进样器温度：5℃ ；检测波长为245nm。钩藤碱及异钩藤碱的检测波长均为245nm；理论塔板数按钩藤碱和异钩藤碱，峰面积计算应不底于3000；进样量10。 对照品溶液的制备：精密称取钩藤碱和异钩藤碱对照品加甲醇制成每1mL含60μg和每1mL含80μg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备：取本品粉末(过3号筛)约，精密称定，加入氯仿:甲醇（5:1）的混合溶剂20mL，冰箱5℃放置过夜，加氨水，低温超声40分钟，过滤，用氯仿:甲醇（5:1）的混合溶剂洗涤容器及滤渣，滤液置蒸发皿中，在65℃水浴上挥干，残渣加甲醇定容置3mL容量瓶中，摇匀，微孔滤膜过滤，既得。 线性关系考察：精密称取钩藤碱和异钩藤碱对照品适量加甲醇制成每1mL含 46mg?mL-1的钩藤碱溶液。和每1mL含 751mg?mL-1的异钩藤碱溶液。精密吸取上述混合对照品溶液2ul、6ul、10ul、14ul、18ul、按顺序进样，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积为纵坐标，异钩藤碱和钩藤碱为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程：异钩藤碱Y=2 042 9 X-1 1， r= 0 结果表明异钩藤碱在 64~ 76μg进样量与峰面积的线性关系良好。钩藤碱Y=2 466 5X+13 0，r= 8结果表明钩藤碱在 44~ 96μg进样量与峰面积的线性关系良好。 精密度实验：精密吸取同一浓度的混合对照品溶液，重复进样6次，每次10 μL，钩藤碱峰面积D为%，精密度良好。异钩藤碱峰面积D为%，密度良好。 稳定性实验：取供试品溶液 ，按0、2、4、8、12、24 h进样，每次进样10μL，异钩藤碱峰面积D为%，钩藤碱峰面积D为%，表明样品在24小时内稳定。 重复性实验：取榕江钩藤药材粉末（过3号筛）约精密称定，按样品测定方法，平行制备6份供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪测定，异钩藤碱含量平均值为 07%；D为%。钩藤碱含量平均值为 45%；D为%。重复性良好。 回收率考察实验：采用加样回收法，精密称取已知异钩藤碱质量分数为 7mg/g， 钩藤碱质量分数为 5mg/g的样品6份，分别精密加入一定量的异钩藤碱和钩藤碱对