Nestin阳性细胞和BrdU阳性细胞在多病程EAE大鼠脑内分布情况及形态学观察.docxVIP

英文缩写 英文缩写 英文缩写EAE 英文缩写 EAE MS PA PBS HE Nestin BrdU SVZ ME OVLT SFO DG IH DAB S-P APES 中文全称实验性变态反应性脑脊髓炎多发性硬化 多聚甲醛磷酸缓冲生理盐水苏木精■伊红神经上皮干细胞蛋白（巢蛋白）漠脱氧尿昔室下区 正中隆起 终板血管器 穹窿下器齿状回免疫组织化学二氨基联苯二胺盐酸盐 链霉素抗生物素过氧化物酶 3-氨丙基三乙基氧基硅烷 英文缩写(Abbreviation) 英文全称Experimental allergic enc-ephalomyelitisMultiple sclerosisParaformaldehydePhosphate buffered salineHematoxylin-Eosin Neuroepithelial nstem protein bromodeoxyuridine subventricular zoon Median eminence Organum vasculosum lamina terminalis Subfornical organ Dentate gyrus immunohistochemistry 3 3 diaminobenzidine streptavidin-peroxidase 3-Aminopropyltriethoxysilane 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 TOC \o 1-5 \h \z 本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。 T 本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 ” 位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则， 承担相应的法律责任。 研究生签名:而［p 导师签名学院领导签名：务者涂 。牙年3月冷日 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写， 文责自负。 研究生签名：忝节7导师签名： 咁年3月浮日 中文摘要 中文摘要 2 2 中文摘要 中文摘要 2 2 中文摘要 中文摘要 Nestin阳性细胞和BrdU阳性细胞在多病程EAE大 鼠脑内分布情况及形态学观察 目的：实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)是研究多发性 硬化(MS)的发病机制及治疗的理想动物模型。本实验以多病 程EAE模型为研究基础，检测神经系统损伤后脑内神经干 细胞的标记物nestin和显示掺入细胞有丝分裂期的标记物： BrdU的表达和分布，从而观察不同病程中脑内神经干细胞 对损伤的反应情况，来探讨神经干细胞在脑损伤后修复过程 中的作用和意义。 方法：以豚鼠脊髓匀浆加完全福氏佐剂作为抗原，给予 Wistar大鼠四足垫加背部皮下注射，建立EAE模型。从临床 表现观察发病情况、HE染色和髓鞘特殊染色在光镜下观察 损伤区与髓鞘分布区域的关系、应用免疫组织化学方法观察 nestin和BrdU的表达、利用photoshop9.0图形软件分别对 nestin和BrdU免疫组化照片伪彩色处理后进行图象合成，观 察相邻切片的nestin和BrdU阳性细胞的相互关系。对免疫 组化结果进行统计学分析，观察各病程组与对照组间以及各 个病程组相互间的关系。 结果：成功获得多病程EAE大鼠模型。在实验中观察 到模型大鼠在发病次数，临床表现和恢复情况有很大的区 别。共分出了五个病程组分别是急性型组、持续进展型组、 缓解一复发型组、良性型组、隐匿型组，两个对照组分别是 正常对照组和发病期组。造模稳定成功率高。 ??=HE染色和髓鞘染色发现:①发病期、缓解一复发型、良 性型和隐匿型的室下区细胞总数明显多于正常对照组，有统 计学意义(P0.05),而预后较差的急性型组和持续进展型组 的室下区细胞总数没有明显增加，与正常对照组无统计学意 义(P0.05),可见室下区细胞总数增多与疾病的恢复和预后有 着重要的联系；②病灶区可见大量的“血管袖套样结构， 这是EAE典型的病理改变，在病变周围可见髓鞘肿胀、崩 解、消失。髓鞘的修复在不同病程组间有着明显的差异，预 后好的大鼠髓鞘多可完全恢复，预后差的大鼠可见髓鞘破坏 严重修复不完全。③病灶区被严格限制在了由两侧的侧脑 室、月并服体和视交叉共同围成的近圆形区域内。 ??= 免疫组化观察发现：(Dnestin的表达：nestin主要表达在 室下区、病灶区(包括月并服体、前连合、视交叉)