神经生物学实验课细胞培养.pptxVIP

原代神经细胞培养;原代培养细胞的生命归宿;3;贴附生长型细胞 必须贴附于底物才能生长的细胞。从形态上大体分为上皮细胞型及成纤维细胞型，还有一些难以确定其稳定形态的细胞。见于各种实体瘤细胞 悬浮生长型细胞 不需要附着于底物而于悬浮状态下即可生长。见于各种造血系统肿瘤细胞 ;;;; 每代贴附生长细胞的生长过程;游离期： 细胞接种后在培养液中呈悬浮 状态．也称悬浮期。此时细胞质回缩，胞体呈圆球形。 10分钟一4小时;贴壁期： 细胞附着于底物上，游离期 结束。 底物：胶原、玻璃、塑料、其它细胞等 血清中有促使细胞贴壁的冷析球蛋白和纤粘素、胶原等糖蛋白（生长基质），这些带正电荷的糖蛋白先吸附于底物上，悬浮细胞再与底物附着。 进口塑料培养瓶涂有生长基质（化学合成的功能基团） ;11; ;潜伏期 此时细胞有生长活动，而无细胞分裂。细胞株潜伏期一般为6～24小时。 ;对数生长期： 细胞数随时间变化成倍增长，活力最佳，最适合进行实验研究。 ;停止期（平台期）： 细胞长满瓶壁后，细胞虽有活力但不再分裂 机制：接触抑制、密度依赖性 ;16;原代神经细胞培养操作步骤 1. 超净台紫外灯照射消毒，至少30分钟，开恒温水浴箱至37℃ 2. 取出高糖DMEM、FBS、胰蛋白酶复温。 3. 取新生鼠1只，0.5