《《细胞工程实验》》课程教学大纲（本科）.pdfVIP

《细胞工程实验》 Cell Engineering Experiment 课程编号 课程教学总学时：48 实验总学时：16 总学分：2.5 先修课程：生物化学、细胞生物学、分子生物学、遗传学等 适用专业：生物技术 一、目的与任务 细胞工程实验是生物技术本科专业的主要实验内容之一，主要训练学生掌握细 胞、组织培养的基本技能和操作要领，实验方法立足于学科的专业基础和常规生物 学实验室的条件，将《细胞工程》课程的理论知识、一般实验技能和科学研究的初 步方法融为一体，培养学生理论联系实际、独立思考及实践动手能力。 二、实验教学的基本要求 本实验教学要求学生掌握细胞工程学研究的主要方法、基本技能。在今后工作 中能独立进行包括实验室主要仪器设备的操作、培养基制备、灭菌消毒技术、细胞 原代培养、细胞传代培养、植物细胞培养等研究。 三、 本课程开设的实验项目 序号 实验项目 实验内容提要 学时 实验类型 细胞工程实验室常用 学习倒置显微镜、超净工作台、培养箱、灭菌锅 1 仪器设备及培养用具 等设备的使用方法；学习培养器械的清洗、包装、 2 先期 的清洗和灭菌 消毒和灭菌方法。 细胞培养主要溶液的 2 学习缓冲液、培养基的配置、灭菌和分装方法 2 先期 配制 烟草（番茄、拟南芥 学习通过筛选培养基初步鉴定转基因植物种子 3 4 综合性 等）种子培养无菌苗 或者培养后续试验的材料等 4 植物细胞的悬浮培养 学习植物细胞提取及培养方法 4 综合性 5 动物细胞原代培养 学习动物细胞提取及原代培养方法 4 综合性 6 动物细胞融合 学习诱导细胞融合的原理及掌握细胞融合技术 4 综合性 7 原生质体的制备 学习掌握植物细胞原生质体的分离和纯化方法 4 综合性 8 原生质体转化 学习诱导植物体细胞杂交的技术方法之一 4 综合性 烟草（西洋参等）发 9 学习发状根诱导及培养技术 4 综合性 状根培养 转基因植（动）物基 10 学习转基因植物外源基因转入鉴定的方法 4 验证性 因转入鉴定 试验 1. 烟草（番茄、拟南芥等）种子培养无菌苗 （一）、实验原理及目的要求 种子培养是指受精后发育完全的成熟种子和发育不完全的为成熟种子的无菌培养。利用种子 培养可以使远缘杂交产生的杂种败育种子，正常萌发产生第二代植株；可以打破种子休眠，特别 对一些休眠期长的植物，可以作为大量生产试管苗的好材料；可以通过筛选培养基初步鉴定转基 因植物种子；或者做为后续试验的材料等等。通过本次实验，要求学生学习种子培养的基本方法 和步骤，掌握种子的消毒灭菌和培养方法。 （二）、材料、仪器与试剂 1、烟草（或番茄、拟南芥）种子等。 2 、三角瓶、培养瓶、镊子、封口塑料、pH 计、高压灭菌锅、光照培养箱、超净工作台等。 3、MS 固体培养基（或筛选培养基）、70%酒精、次氯酸钠、（0.1 ％的Tween ）、无菌水等。 （三）、方法步