dna复制和rna转录学习.pptxVIP

第1页/共75页? 分子遗传的中心法则 DNA是遗传信息的储存和发布者，它在如图的联系中处于中心地位第2页/共75页? 中心法则的几个基本概念 ?复制：以亲代DNA或RNA为模板，根据碱基配对的原 则，在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的 子代DNA或RNA的过程。?转录：以DNA为模板，按照碱基配对原则合成RNA， 即将DNA所含的遗传信息传给RNA，形成一条 与DNA链互补的RNA的过程?翻译：亦叫转译，以mRNA为模板，将mRNA的密码解 读成蛋白质的氨基酸顺序的过程?逆转录：以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，生成 DNA的过程第3页/共75页§1.1 DNA指导下的DNA复制§1.1.1 DNA复制的特点半保留复制半不连续复制第4页/共75页? 半保留复制 以亲代DNA双链为模板，按照碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制 第5页/共75页半保留复制的实验依据 ? 1953年, Watson和Crick提出DNA的半保留复制机制? 1958年,Meselson 和Stahl将同位素15N标记的15NH4Cl加入大肠杆菌的培养基中培养12代，使大肠杆菌的DNA都带上15N的标记，然后将该大肠杆菌转入14N的普通培养基中培养后，分离子一代、子二代、子三代、子四代DNA，进行氯化铯密度梯度离心，实验证明了DNA的半保留复制第6页/共75页半保留复制的实验依据 第7页/共75页 DNA复制的起点和方向第8页/共75页 DNA复制的起点和方向? 两个起点，两个生长端的相向复制 DNA每条链有1个复制起点，分别合成1条新DNA，两条新链相向合成，每个生长点只有1条链合成，这种方式存在于线性DNA病毒? 1个起点，1个复制区的单向复制 DNA两条链的复制起始点在同一位置，复制向一个方向运动，两条DNA链均被复制，这种方式偶见于一些环形DNA的复制? 1个起点，两个复制区的双向复制 这种DNA复制方式最为普遍，复制起始于1个位点，形成两个复制区向相反方向运动，在每个复制区两条DNA链均被复制第9页/共75页DNA复制的起点和方向第10页/共75页? 半不连续复制 DNA双螺旋的两条链是反向平行的，而合成方向只能是5‘?3’。所以在DNA复制时，1条链的合成方向和复制叉的前进方向相同，可连续复制，称为前导链；而另一条链的合成方向和复制叉的前进方向正好相反，不能连续复制，只能分成几个片段合成，称为滞后链。滞后链的片段叫作冈崎片段(~1000b)，它们合成后再连接起来（前导链）冈崎片断（滞后链）第11页/共75页§1.1.2 DNA复制的酶系第12页/共75页拓扑异构酶解开超螺旋第13页/共75页拓扑异构酶解开超螺旋?DNA拓扑异构酶催化的反应本质是先切断DNA的磷酸二酯键，改变DNA的链环数之后再连接之，兼具DNA内切酶和DNA连接酶的功能?其断裂反应与连接反应是相互偶联的，不能连接事先已经存在的断裂DNA第14页/共75页解链酶和SSB的作用第15页/共75页引物酶合成RNA引物第16页/共75页DNA聚合酶延长子链第17页/共75页原核细胞DNA聚合酶第18页/共75页连接酶连接2个冈崎片断第19页/共75页连接酶连接2个片断的三步反应第20页/共75页DNA复制酶系总览第21页/共75页§1.1.3 DNA的复制过程第22页/共75页DNA的合成步骤 ?解旋：由拓扑异构酶解除DNA的超螺旋结构?解链：由解链酶使双链DNA解开再由单链结合 蛋白与单链结合，防止氢键再形成?识别起点：由DNA指导的RNA聚合酶即引物酶 完成?生成引物：以DNA为模板在引物酶催化下由 DNA转录成? DNA的生成：在RNA引物3?末端上按碱基互 补原则经DNA聚合酶III催化生成，其 3 ?末端与下一个RNA引物5 ?末端相连第23页/共75页?切除引物：由DNA聚合酶I催化切除引物， 剩下的DNA片段即冈崎片段?补齐封口：DNA聚合酶I利用其DNA聚合酶 活性按碱基互补原则沿5 ?—3 ?方向填 补两个冈崎片段之间的缺口。其3 ? 末端羟基与下一个DNA片段5 ?末端 相连磷酸基，在DNA连结酶催化下 形成磷酸二酯键而被连结起来，最 终形成DNA模板链的完整新的互补 链，此部由NAD+供能第24页/共75页DNA合成的起始与延伸第25页/共75页引物的切除，缺口填补，切口连接第26页/共75页真核细胞DNA的合成 ?真核细胞与原核细胞DNA的复制区别? RNA引物和冈崎片段较小? 复制速度较慢，这可能与组蛋白的存在使DNA处于稳定的双股状态有关? 复制有多个起点? DNA聚合酶为α，β，γ以及线粒体聚合酶。它们仅能催化聚合作用，而没有原核细胞DNA聚合酶所有的