霉菌污染的处理方法.docxVIP

避开真菌污染的几个措施： 1、严格的无菌操作； 2、无菌间定期清扫、消毒，保持干燥； 3、各种培育液、培育器皿的严格消毒； 4、温箱中消毒水中放置过饱和的消毒的磷酸氢二钠或者硫酸铜。 假如细胞好养或有存货的话，干脆从头作起，要是舍不得可以用PBS液洗3遍，在新的培 基中加两性霉素。 比方霉菌包子感染可能这样，由于我的前面一批细胞就这样，培育基不混，细胞内有许多空 泡，且可见一些比细胞大得多无明显细胞结构的“圆形细胞”里面有许多小的空泡，假如是这 样的话，那就是霉菌污染 （1）操作：做试验时应养成无菌观念（操作前用70%酒精榛手，试验时如吸管等物 品接触到台面应马上更换，并隔3-5分钟用酒精灯烧灼吸管）。 （2）超净台：假如超净台使用时间过长（3-5年以上），应准时更换滤板。消毒的紫 外灯管也按时更换。在操作前用酒精或新洁尔灭榛拭台面。 （3）孵箱：怀疑孵箱污染时，将孵箱关掉，然后用上述消毒剂消毒，之后用移动紫外 消毒车将紫外灯插入孵箱照耀30分钟以上。 zrzhong6519：还有留意孵箱内的水盆，常常检查，如觉察有絮状物，马上更换灭 菌水，之前用75%乙醇擦拭，其次天要准时观察是否彻底，不彻底在按上述方法再来。 天气酷热，霉菌也开头肆无忌惮的繁殖。想想去年这个时候，也被霉菌折腾得郁闷无 比。还好后来掌握住了。阅历如下： 1、细胞培育室大扫除，水池、吸引器中的引流瓶等无一不是霉菌孳生的地方。然后室 内进行紫外灯照耀杀菌。 2、培育箱消毒时是否留意了里面的几层钢板。紫外线照耀时得拿出来。我当时干脆就 放到180度烤箱里考过夜。 3、处理培育箱时还有个要考虑的地方，培育箱内的细胞培育瓶。重新放回去的时候得 用酒精将瓶周搽洗数次，能换掉更好。 4、培育箱搽洗时重点在箱底的四个角落。 整个培育间用福尔马林和高镒酸钾熏蒸，孵箱内部包括托盘等全部用苯酚搽洗，封闭2天，基 本就没问题!!但培育良好的无菌观念是前提！ 可能的缘由： 1、天气太热，试验者在培育和接种或者换液时出汗（有空调稍好，但是手也出汗）。 2、培育间里可能暗藏污染原。 3、留意培育箱（这点最重要），认真检查培育箱里的隔板的下面，有可能有霉菌斑。 （我遇到过） 4、培育基污染多数是配置过程中造成的，认真检查配置过程用到的器具。 5、血清过期一个月，假如保存的好应当没有问题，但是保存不好，新来的血清，用一 次就可能污染。血清过期和污染是否有必定的联系不好说，个人体会觉得其联系不大。 解决方法： 1、彻底清洁培育间，显微镜室。然后，紫外灯多照耀一端时间消毒空气。 2、彻底清洁培育箱：（1）每个隔板认真清洗，火烤。（2）培育箱大换水，换成新奇 洁净的蒸储水。（3）培育箱内壁用酒精棉球或者稀过氧乙酸认真擦洗。（4）紫外灯长时 间照耀（一天）。 3、试验用器械消毒：留意消毒时间和压力，有必要检查压力锅和校正压力表是否精确O 4、一次性手套在翻开使用前一天放入无菌间照耀消毒。 5、假如用双抗，应当现用现配。 6、留意过滤器的消毒灭菌。 7、过期的血清，可以做培育检查是否被污染。如有怀疑，建议不用。 8、检查培育间和超净台的通风过滤网，假如脏了，需要更换。 总之，潮湿闷热天气培育细胞特别简单污染，必需留意每一个环节。真菌多数是空气 中悬浮污染，所以除紫外线照耀外，每次进出培育间要用来苏或者新洁尔灭搽地，削减空气 悬浮颗粒及细菌 1、用碘伏认真擦洗浮箱和操作台，地面，然后用紫外灯照1小时 2、处理完细胞放回浮箱是用酒精棉擦培育瓶的底部 避开污染，我认为： 1、每次做完试验，超净台要用酒精喷擦；翻开紫外线照耀； 2、严格无菌操作； 3、孵箱定期清洗，换水； 4、每次观看细胞后，酒精喷瓶口; 1、我操作的时候，总是在灭菌同时超净台外侧窗口处，喷一些医用酒精，以掌握四周 四周的空气中漂移菌。 2、在做完试验后，超净台里喷一遍医用酒精，然后严格根据紫外灭菌等操作。 3、还有，超净台长时间使用了的话，要把里面的防尘过滤网拆下来，用吸尘器或者 其他东西吸净，洗净。