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PAGE2 / NUMPAGES2 药物分析开发中如何分辨“鬼峰”及解决技巧 高效液相色谱中梯度方法观察到的鬼峰有许多可能的原因，然而几乎总有一个共同的机制即：当流动相具有较高的洗脱强度时，流动相中有紫外吸收的有机杂质在柱上聚焦成组分带，并随后在梯度中洗脱。这些流动相杂质的潜在“来源”是广泛的。鬼峰的其他原因包括流动相输送的物理或机械方面、样品引入和固定相效应。色谱图可能包含来自各种来源的鬼峰，这使得鬼峰问题的整体解决非常困难。 ? ? ? ? 在下面的讨论中，更详细地说明了杂质聚焦机理，并讨论了一些新的和以前公认的原因以及识别和修复鬼峰问题的技巧。 ? 一、流动相污染与能带压缩机制 ? ? ? ?在所有色谱中，纵向扩散会增加分离组分的带宽。在等度色谱高效液相色谱中，人们试图在纵向扩散变得不可控制和峰太宽之前洗脱组分。在梯度洗脱色谱中，存在动态压缩组分带的主动聚焦机制(带/峰压缩)。梯度高效液相色谱运行中观察到的峰宽是同步扩散和聚焦过程的产物。在线性溶剂梯度中，峰宽在整个过程中应该近似恒定。 ? ? ? ? ?聚焦机制可以合理化如下：想象一个组分带广泛扩散在高效液相色谱柱的顶部。当施加溶剂梯度时，带后部的有机溶剂浓度总是高于带前部。因此，带前的组分分子比带后的组分分子更强地被固定相保留。因此，带后的成分分子总是更快移动，任何落后的会被更强的洗脱液聚集，并更快地向前移动以