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南开大学微生物-第二章纯培养和显微技术.pdfVIP

南开大学微生物-第二章纯培养和显微技术.pdf

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微生物学特有的实验技术 微生物如何纯培养? 第二章 研究其群体 如何分离微生物纯种? 微生物的纯培养和显微技术 小! 镜下微生物形态多样 显微镜观察 各种显微技术 第一节微生物的纯种分离和纯培养 (一)无菌技术(aseptic technique) 在分离纯种、转接纯种、培养纯种过程中,为保持纯种的 菌种是宝贵的天然资源,生境中多种微生物混杂群居,以纯种 “纯洁”性而防止其它微生物污染的技术。 进行研究、应用和繁衍。因此,纯种分离、培养是最基础的工作。 一、纯种分离、培养“特有的实验技术” 1、所用物品的灭菌技术 微生物的纯种分离 A、玻璃或金属器皿灭菌 将多种混杂的微生物,经某种技术或方法分离或纯化的过程。 干热灭菌:干燥箱(160-170 °C 干热空气2小时灭菌) 纯培养 (pure culture): B、培养基或溶液灭菌 在适宜条件下培养纯化获得的培养物(群体)。 纯种分离、培养所用器具及操作要“严格无菌” 湿热灭菌:高压蒸汽灭菌器( 121 °C 热蒸汽30分钟灭菌) 干燥箱 高压自动灭菌锅 C、血清或生长因子溶液灭菌 过滤除菌:细菌滤器 压力表 滤膜 (孔径小于细菌细胞的大小) 1 C、无菌室 UV杀菌、超净工作台火焰区操作。 B、超净工作台无菌操作移液 “树立无菌意识,规范无菌操作、保证纯种培养” 2、无菌操作 (二)固体培养基分离纯种菌落(colony) 琼脂营养平板 A、火焰旁无菌操作接种 菌落 单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度形成的 肉眼可见、有一

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