生化分离工程苏海佳第三章细胞破碎.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * 方法 技术 原理 效果 成本 举例 机械法 研磨法 细胞被研磨物磨碎 适中 便宜 超声波法 用超声波的空穴作用使细胞破碎 适中 昂贵 细胞悬浮液小规模处理 匀浆法（孔型） 须使细胞通过的小孔，使细胞受到剪切力而破碎 剧烈 适中 细胞悬浮液大规模处理 珠磨破碎法 细胞被玻璃珠或铁珠捣碎 剧烈 便宜 细胞悬浮液和植物细胞的大规模处理 细胞机械破碎法比较 第三十一页，共四十四页。 ※ 3.4 CHEMICAL METHODS 化学方法 第三十二页，共四十四页。 1.碱处理 利用酸碱调节pH值，可提高目标产物溶解度。 pH= 11.5-12.5碱处理 20－30min可导致细胞溶解。 缺点：pH=11－11.5的碱浓度破坏了许多生物活性，使蛋白酶失活，常伴随着蛋白的变性和降解。 优点：价格便宜，易适于任何规模的操作。 第三十三页，共四十四页。 2. 化学试剂法 化学渗透取决于试剂的类型和细胞壁、细胞膜的结构与形成。 1).EDTA 螯合剂，对细胞的外层膜有破坏作用。如E-coli； 原因：二价阳离子，尤其是Mg2＋对革兰氏阴性菌细胞被膜以外层膜的稳定作用是重要的，EDTA的螯合作用导致外层膜不稳定或去除。 第三十四页，共四十四页。 2).有机溶剂法 可使细胞膜表面发生变化，胞内产物可以释放出来，由于没有整体破碎细