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含固量较多的发酵液,可采用倾析式(或称螺旋型)离心机。 结构原理: 该设备由卧式圆柱—圆锥形转鼓以及螺旋输送器组成,两者以稍有差别的转速同向旋转。 发酵液由位于转鼓轴线上的进料管输入并被抛到转鼓壁上,固体颗粒沉积于转鼓内表面,靠螺旋输送器向转鼓的锥形部分移动,并借助离心力使其脱水和压实, 最后从转鼓末端排出,而液体则沿着鼓径较大的方向移动,从溢流口流出。因此在转鼓内固相和液相的运动方向相反。 与常规过滤的区别: 固体悬浮物流动方向与过滤介质平行,而常规过滤则是垂的,因此,能连续清除过滤介质表面的滞留物,使滤饼不能形成,所以整个过滤中能保持较高的滤速。 错流过滤的过滤介质通常为微孔膜或超滤膜。 4、 错流过滤 当料液中悬浮的固体粒子十分细小,采用常规过滤滤速极慢,而离心分离费用又太大时,错流过滤能显现出它独特的优点。 缺点:固液相的分离不太完全。目前,还仅适合于规模较小的操作过程,在小规模生产中它比离心分离经济。 第2章 发酵液的预处理和菌体的回收 生化分离工程的工艺流程: 一、悬浮液的基本性质 1.水的极性 2.水的粘度 3.水的表面张力 二.发酵液的预处理技术: (一)预处理的目的 改变料液性质,促进固液分离,提高分离效率 除去部分杂质(杂蛋白和不溶性的多糖等),以利后续操作 尽可能使产物转移到后处理的相中,利于提取和精制的顺利进行。 (二)发酵液的预处理技术方法: (重点) ①物理性质的改善 ②杂质的去除 预处理的方法 加热(降低黏度、去除杂蛋白) 凝聚与絮凝(增大粒度) pH、稀释 去杂蛋白(沉淀、变性、吸附) 去多糖(酶解) 去离子(沉淀) 加助滤剂(改善过滤) 1.加热 最简单、最经济的预处理方法是加热,加热不仅可以增加料液的操作特性,也可以使杂蛋白变性聚集。 但加热变性的方法只适合于对热稳定性的产物。 2.稀释:降低粘度 : (1)两性物质(杂质):等电点沉淀法 (2)膜分离-改变易吸附分子的电荷状态即减少吸附造成的堵塞和污染 (3)细胞碎片等 凝聚和絮凝的基本过程: 将化学试剂预先加入到悬浮液中,改变细胞、菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态,使聚集起来,增大体积,以便于过滤。(破坏稳定性) 最重要的预处理方法,常用于菌体细小而且粘度大的发酵液的预处理中。 4.凝聚和絮凝技术 凝聚是指在电解质的作用下,胶体脱稳并使粒子相互聚集成1mm大小的凝聚体的过程。 絮凝是指在某些高分子絮凝剂存在下,基于架桥作用,使胶体粒子交联成网状10mm大小絮凝团的过程。是一种以物理的集合为主的过程,絮凝剂主要起架桥作用。 凝聚和絮凝的概念 a.主要是带有相同电荷和扩散双电层的结构,一旦由于布朗(Brown)运动使粒子间距离缩小到它们的扩散层部分重叠时,即产生使两个粒子分开:从而阻止了粒子的聚集。ζ电位越大,电排斥作用就越强,胶粒的分散程度也越大, b.由于胶粒表面的水化作用,形成了包围于粒子周围的水化层,也能阻碍胶粒间的直接聚集。 (1)胶粒能保持分散状态的原因 凝聚技术 根据活性基团在水中解离情况不同,可分为非离子型、阴离子型(含有羧基)和阳离子型(含有胺基)三类。 优点:用量少,—般以ppm计,絮凝体粗大,分离效果好,絮凝速度快、种类多,适用范围广。 缺点:存在一定的毒性,特别是阳离子型聚丙烯酰胺,因此,当用于食品及医药工业时,应谨慎使用,要考虑这些物质最终能否从产品中去除。 近年来还发展了聚丙烯酸类阴离子聚凝剂,它们无毒,可用于食品和医药工业中。 聚丙烯酰胺类絮凝剂: 阳离子型高分子絮凝剂对带负电菌体或蛋白质来说,同时具有降低粒子排斥电位和产生吸附架桥的双重机理,所以可以单独使用, 非离子型和阴离子型高分子絮凝剂,主要通过分子间引力和氢键产生吸附架桥,常与无机电解质凝聚剂搭配使用。 首先加入无机电解质,使悬浮粒子脱稳而凝聚,然后,再加入絮凝剂。凝聚作用为絮凝剂的架桥创造了良好的条件,从而,提高了絮凝效果。 这种包括凝聚和絮凝机理的过程,常称为混凝。 混凝: 絮凝剂浓度 絮凝剂分子量 絮凝剂类型 溶液的pH 搅拌速度和时间 助凝剂 影响絮凝效果的因素: A. 絮凝剂浓度 浓度增加有助于架桥充分,但是过多的加量会引起吸附饱和,在胶粒上形成覆盖层而产生再次稳定现象。 分子量提高、链增长,可使架桥效果明显,但分子量不能超过一定的限度
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