体内药物分析方法及方法的设计与评价.pptVIP

②粪和尿：大鼠粪便样品于室温风干称重后，置乳钵内研成细末，用生理盐水按10％稀释使其成混悬液。取混悬液0.5mL或尿样0.5mL用乙酸乙酯4.0mL提取两次，合并两次提取液，于50℃水浴用氮气吹干，加入甲醇1.0 mL，振荡溶解后进样10 uL。 ③组织匀浆：将大鼠断头处死，取心、肝、脾、肺、肾、胃、肌肉、脑、睾丸各组织，称重，用组织匀浆器制成生理盐水匀浆，使每mL含各组织0.4g，取此匀浆0.2mL，按血浆样品处理方法进行处理分析。 例如取一定量被测药物标准品，加到空白血样中，按规定方法处理，使最后溶液中药物标准品浓度为1ug/mL，测定色谱峰面积，记为A测，另取1ug/mL的药物标准品的纯溶剂溶液宜接进样，测得色谱峰面积记为A真，用外标法计算。 绝对回收率应考察高、中、低3个浓度，低浓度选择在定量限(LOQ)附近，高浓度在标准曲线的上限附近，中间选一个浓度。对于回收率的大小与变异不宜苛求，一般添加量在10-6～10-9级，绝对回收率若能达到50％～80％，应认为是令人满意的。 在色谱分析中常采用内标法测定含量，将药物标准品和内标准物质加到空白血样中，按规定方法处理，测得药物和内标峰面积，求出它们的比值R测＝A药/A内。另取相同浓度的药物标准品和内标准物质的纯溶剂溶液进样，得药物标准品和内标峰面积，计算两者的比值R真＝A药/A内。再根据下式求出回收率： 在内标法中，应注意药物