信号转导研究方法(1).ppt

信号转导通路 研究策略和常用方法 ;功能分析; 基因水平 转录水平 转录后加工 翻译水平 翻译后加工 mRNA和蛋白质降解;基因表达分析方法;1. 蛋白质表达水平和细胞内定位研究 信号蛋白分子表达水平检测: Western blot analysis. ELISA Proteomics 信号蛋白分子在细胞内定位研究: Immunohistochemistry / Immunocytochemistry Immunofluorescence (IF) Green fluorescent protein (GFP)-fusion protein—typically, live cells.;印迹技术 blotting;又称蛋白质印迹技术或免疫印迹技术。蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后转移（电转）至膜性???持物上(NC膜）,再与溶液中的抗体相互结合的技术。 主要用于检测样品中特异性蛋白质的存在、细胞中特异蛋白质的半定量分析、蛋白质化学修饰（磷酸化），以及蛋白质分子间的相互作用研究等。;编辑ppt;;Electrophoresis;;硝酸纤维素膜;应用举例;ELISA / Phosphospecific-ELISAs (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) ;蛋白质组（proteome）： 一个基因组所表达的全部蛋白