蛋白质的sdspage电泳.pptVIP

2 皱眉现象 由于垂直电泳槽的装置不合适引起的，特别是当明胶和玻璃板组成的“三明治底部有气泡”或靠近隔片的凝胶聚合不完全 3 “拖尾”现象 样品溶解不佳引起 解决办法： 加样前离心 选择合适的样品缓冲液和凝胶缓冲液 加增溶试剂 降低凝胶浓度 4 “纹理”现象 样品中的不溶性颗粒引起的 解决办法： 增加溶解度 离心除去不溶性颗粒 5 偏斜现象 电极放置不平行或加样位置偏斜引起 6 带太宽 加样量太多或者加样孔泄露引起 THANK YOU ! 蛋白质的Western印迹分析 刘二战 一、原理 一个基因表达的最终产物是产生相应的蛋白，因此检测蛋白是测定基因表达的主要标志。 原理：Western Blotting 是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离；并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜进行杂交，使其与膜上的靶蛋白特异性结合；再与经辣根过氧化物酶标记的二抗结合，最后用ECL试剂反应，经X线片曝光、显影等一系列反应，检测蛋白质等生物大分子。 二、方法 样品蛋白的制备 SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳 转膜 检测 三、样品蛋白的制备 1、原理： 蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知