高中生物微生物的实验室培养.pptVIP

半固体培养基： 无动力 有动力(弥散) (是否运动) 第30页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 4.培养基的用途 液体培养基：增菌 固体培养基：纯化，增菌 半固体培养基：动力检测，保种 第31页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 （二）无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。无论是随后将要学到的倒平板、平板划线操作，还是平板稀释涂布法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。 第32页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 　（１）消毒定义： 　　利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物的过程。区分为高程度消毒（High-level Disinfection）、中程度消毒（Intermediate-level Disinfection）、低程度消毒（Low-level Disinfection）三种方式。 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 第33页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 　　（2）灭菌的定义： 　　以化学剂或物理方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。 第34页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 …… (1)消毒的方法： 3.常用的消毒与灭菌的方法 第35页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min. (2)灭菌的方法： 第36页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。 而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 第37页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 分类 定义 方法 灭菌法 杀灭一切微生物 物理法：热力、辐射、微波、等离子体 化学法：醛类、烷化剂 高效消毒法 杀灭一切致病微生物 紫外线、含氯剂、臭氧、复配剂等 中效消毒法 杀灭除芽孢外的致病微生物 超声波、碘类、醇类、酚类 低效消毒法 杀灭细菌繁殖体、亲脂病毒 单链季胺盐、双胍类、中草药、金属离子 无菌技术 第38页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 3.微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存 第39页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 旁栏思考 第40页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 三、实验操作 1.制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 第41页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 1．计算、称量 2．溶化 3．调pH：　pH7．6　 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎 操作步骤 第42页，共63页，2022年，5月20日，10点44分，星期四 8．灭菌: 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，