生化工程精品课件-影响酶反应的因素.pptVIP

生化工程精品课件-影响酶反应的因素.ppt

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* * 溶菌酶的三维构象。 * 为什么酶反应的最佳pH会是在pK1和pK2之间? 考虑到酶发挥最佳的活力状态是EH,最佳pH应该是唯一的,而在最佳pH时,EH的浓度应该达到最大。 因此,我们现在只要考察酶与质子H+的相互作用。 根据解离常数的定义和酶的质量守恒可得: * Pepsin:胃蛋白酶 Glucose-6-phosphatase of hepatocytes * 在较低的温度范围内,酶催化反应速率会随着温度的升高而加快,超过某一温度,即酶被加热到生理允许温度以上时,酶的反应速率反而随着温度的升高而下降。 这是由于温度升高,虽然可加速酶的催化反应速率,同时也加快了酶的热失活速率。 * 以 ln v 对 1/T 作图,得到一直线,斜率为 –Ea/R. * 生化工程 1 第二章 均相酶催化反应动力学 Lysozyme 堵国成 教授 * 第三节 影响酶催化反应速率的因素 影响酶催化反应速率的因素有很多,它们会影响到 酶的结构或化学状态。 pH 温度 表面张力 化学试剂(醇, 脲和过氧化物) 辐射(光,微波,离子化, g 射线等) * pH对酶促反应的影响 一些酶的活性中心存在离子基团,因此反应体系的pH变化会影响酶和底物的结合 Variation of pH 另一方面,底物分子中包含离子基团,反应体系的pH也有可能会影响到底物与酶结合的亲和力。 Ionic form Modifies Reaction rate Changes Enzyme activity Influences * For CASE I (Ionic Enzyme): The reaction scheme is as follow: Where the meanings of the denotations are: EH: active form E-, EH2+: inactive form E-: deprotonation form EH2+: protonation form * With similar analysis and derivations as before, we can get, where * 考虑到酶发挥最佳的活力状态是EH,最佳pH应该是唯一的,而在最佳pH时,EH的浓度应该达到最大。 为什么酶反应的最佳pH会是在pK1和pK2之间? 因此,我们现在只要考察酶与质子H+的相互作用。 根据解离常数的定义和酶的质量守恒可得: * 消除 [E-] 和 [EH2+] 项,可得到: 令 得到, 即, * For CASE II (Ionic Substrate) The reaction scheme is as follow: Similarly, we can get, where S H + + E S + H + E S H + K m E + H P + k 2 K 1 * 一般来说中,酶促反应的最佳pH还是很难预测的,通常需要通过实验来确定。 pH-activity profiles of two enzymes. (A)胃蛋白酶; (B) 延胡索酸酶(以苹果酸为底物时) * 温度对酶促反应的影响 在较低的温度范围内,酶催化反应速率会随着温度的升高而加快,超过某一温度,即酶被加热到生理允许温度以上时,酶的反应速率反而随着温度的升高而下降。 这是由于温度升高,虽然可加速酶的催化反应速率,同时也加快了酶的热失活速率。 * 温度激活作用 (上升区) 酶催化反应速率常数中的k2与温度的关系符合Arrhenius方程: 即, 式中 [E] 活性酶的浓度; Ea 是反应活化能 (kcal/mol). R 是气体常数 T 是绝对温度,A是前因子 * 热失活作用 (下降区) (酶的热变性作用) 酶的热变性失活符合一级反应动力学方程: 式中 [E0] 酶的初始浓度; kd 变性常数. 积分得到, 此外, 式中 Ed is the denaturation energy (kcal/mol). * * 溶菌酶的三维构象。 * 为什么酶反应的最佳pH会是在pK1和pK2之间? 考虑到酶发挥最佳的活力状态是EH,最佳pH应该是唯一的,而在最佳pH时,EH的浓度应该达到最大。 因此,我们现在只要考察酶与质子H+的相互作用。 根据解离常数的定义和酶的质量守恒可得: * Pepsin:胃蛋白酶 Glucose-6-phosphatase of hepatocytes * 在较低的温度范围内,酶催化反应速率会随着温度的升高而加快,超过某一温度

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