食品生物化学实验课件(共38单元)26-实验二十六-果蔬中多酚氧化酶-(PPO)-的提取与活力测定.pptxVIP

食品生物化学实验 FOOD BIOCHEMISTRY EXPERIMENT 实验二十六 果蔬中多酚氧化酶 （ＰＰＯ） 的提取与活力测定 一、实验目的 了解多酚氧化酶的作用， 学习果蔬组织中多酚氧化酶活性的测定方法， 理解果实受伤、 组织变褐的原因等。 二、 实验原理 多酚氧化酶 （ＰＰＯ） 是一种以铜为辅基的酶， 能催化多种简单酚类物质氧化形成醌类化合物， 醌类化合物进一步聚合形成呈褐色、 棕色或黑色的聚合物。 在后熟衰老过程或采后的贮藏加工过程中， 果蔬出现褐变与组织中的多酚氧化酶活力密切相关。 多酚氧化酶催化邻苯二酚氧化物形成的产物在 ４２０ｎｍ 处有最大光吸收峰。 因此， 可以用比色法测定多酚氧化酶的活力。 三、 器材与试剂 １.器材 研钵， 高速冷冻离心机， 分光光度仪， 计时器， 移液器， 容量瓶等。 ２.实验材料 果蔬组织。 三、 器材与试剂 3.试剂 （１） ０.１ｍｏｌ ／ Ｌ 乙酸－乙酸钠缓冲液 （ ｐＨ５.５） 母液 Ａ （２００ｍｍｏｌ ／ Ｌ 乙酸溶 液）： 量取 １１.５５ｍＬ 冰乙酸， 加蒸馏水稀释至 １０００ｍＬ； 母液 Ｂ （２００ｍｍｏｌ ／ Ｌ 乙 酸钠溶液）： 称取 １６.４ｇ 无水乙酸钠 （或称取 ２７.２ｇ 三水合乙酸钠）， 用蒸馏水溶解、 定容至 １０００ｍＬ。 取 ６８ｍＬ 母液 Ａ 和 ４３２ｍＬ 母液 Ｂ 混合后，