食品生物化学实验课件(共38单元)15-实验十五-氨基酸总量-(氨态氮)-的测定———甲醛滴定法.pptxVIP

食品生物化学实验 FOOD BIOCHEMISTRY EXPERIMENT 实验十五  氨基酸总量 （氨态氮） 的测定 ———甲醛滴定法 一、实验目的 （１） 了解氨基酸态氮的测定方法。 （２） 掌握单指示剂与双指示剂甲醛滴定法测氨基酸总量的原理和基本操作 技术。 （３） 掌握 ＮａＯＨ 溶液的标定方法。 二、 实验原理 氨基酸具有酸、 碱两重性质， 因为氨基酸含有羧基 （—ＣＯＯＨ） 显酸性， 又含有氨基 （—ＮＨ２ ） 显碱性。 这两个基团相互作用， 使氨基酸成为中性的内盐。 当加入甲醛溶液时， 氨基与甲醛结合， 其碱性消失， 破坏内盐的存在， 使 氨基酸显示羧基的酸性， 然后可用碱来滴定羧基， 以间接方法测定氨基酸 的量。 二、 实验原理 １.单指示剂甲醛滴定法 百里酚酞指示剂变色范围是 ｐＨ ９.２～１０.５， 颜色变化是由无色到蓝色。在试样中加入中性甲醛溶液后， 固定氨基， 破坏氨基酸的内盐结构， 使其显示出酸性。 然后用 ＮａＯＨ 溶液滴定， 根据指示剂的颜色变化， 确定滴定终点。 根据消耗的 ＮａＯＨ 溶液的量， 计算出氨基酸的量。 二、 实验原理 ２.双指示剂甲醛滴定法 双指示剂甲醛滴定法与单指示剂法相同， 但使用两种指示剂。 从分析结果 看， 双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法相近， 亚硝酸