生态毒理学研究方法.ppt

精选ppt 生态毒理学研究方法 其中一类研究方法： 从复杂系统中发现某些环境要素，研究在此环境要素条件下，污染物的行为(模拟分析)； 利用自然生态系研究污染物的变化； 详细分析环境中的样品，确定污染物定量方法。 毒性的影响因素 生物因素 (1) 生物分类组别(taxonomic group) 种属和个体差异：不同种属的生物或同一种属不同个体之间对同一毒物的反应差异，原因复杂，但主体原因是毒物在体内代谢差异(包括代谢酶)所致。在进行毒性实验时，应尽可能选择条件一致的生物以减少个体差异造成的影响。 (2) 年龄阶段/机体大小 反应灵敏度差异。新生和幼年生物通常对毒物较成年生物敏感。新生生物中枢神经系统发育不完全，对有关的兴奋剂敏感性差，而对抑制剂则较为灵敏。新生生物的膜通透性较强，对某些脂溶性神经毒物的毒性反应较大。经代谢转化后毒性增强的化学物，对新生和幼年生物毒性较成年低，反之，在体内可迅速代谢失活的化学物，对新生和幼年生物毒性可能较大。 (3) 营养与健康 营养不足或失调影响化学物毒性作用。如蛋白质缺乏引起酶蛋白合成减少、活性降低，解毒能力降低，毒性增加。维生素缺乏也有类似情况。健康状况也有影响。 (4) 生物节律 即生物钟，化学物的毒性与其进入体内发挥作用的时间有关。 非生物因素 (1) 温度(每增加10?C，多数有毒物的毒性会变化2到4倍) 影响方式复杂。适应温度和实验温度。 毒性的影响因素 适应温度 耐受温度 抑制水平 (产卵) 负载水平 (活动生长) 致死阈值 5% 致死阈值 50% 最终初始致死温度 三种毒性终点(死亡、生长、 产卵)下的适应温度和耐受温 度的关系。虚线各自内部面积 指示耐受区。 毒性的影响因素 (2) pH和碱度 pH对毒性的影响是多方面的，在酸性条件下(pH?5)时，H+自身对水生生物便是致命的。酸对鱼生理影响的集成模型如下图所示： 2H++Ca3(PO4)2 ? 3Ca2++2HPO42－ 2H++CaCO3 ? Ca2++CO2+H2O H+ CO2+H2O K+ Na+ + HPr H+ +Na+Pr－ H+ H+ 鳃 ECF H++NH4 Na H+ H++HP42－ H++NH3 Ca2+ 肾 骨骼 ICF H++HCO3－ K++HPr H++K+Pr－ K+ HP42+ NH3 H+ NH4 H2PO4 ECF: 外细胞液 ICF: 内细胞液 Pr: 蛋白质 H+还能影响痕量金属的毒性，方式为：(1)影响水中的金属形态；(2)与金属竞争生物膜上的表面反应位。下图为天然水中痕量金属的主要形态及其转化。 毒性的影响因素 不稳定有机络合物 稳定有机络合物 游离离子 颗粒态吸附 无机络合物 胶体形态 按操作定义的金属形态 样品 原始样品在室温下风干，然后在105?C的烘箱中烘干。用玛瑙研钵研磨后，过尼龙筛， 筛选一定孔径的颗粒。取一定量样品，按下述方法对金属进行化学逐级提取： 蒸馏水(W/V＝1:20, 2h, 25?C) 液相：水可溶态 固相 1M/0.5M MgCl2 (pH=7, W/V=1:20, 2h, 25?C) 固相 液相：离子交换态 1M NaOAc (pH=5.1, W/V=1:20, 2h, 25?C) 固相 固相 固相 液相：碳酸盐结合态 液相：中等可还原态 液相：有机－硫化物结合态 0.04M NH2OH?HCl (在25%HOAc中, W/V=1:20, 2h, 96?C) 液相：残渣态 30%H2O2+0.02M HNO3 (pH=2, W/V=1:20, 4h, 85?C) 浓HNO3－HClO4－HF (8h, 160?C) Henderson－Hasselbach方程式 对于弱酸 HA ? H+ + A－ Ka = (H+)(A－)/(HA) logKa = log[(H+)(A－)/(HA)] logKa = log(H+) + log[(A－)/(HA)] －log(H+) = －logKa + log[(A－)/(HA)] pH = pKa + log[(A－)/(HA)] 对于弱碱 HB+ ? H+ + B Ka = (H+)(B)/(HB+) logKa = log[(H+)(B)/(HB+)] logKa = log(H+) + log[(B+)/(HB+)] －log(H+) = －logKa + log[(B+)/(HB+)] pH = pKa + log[(B)/(HB+)] 解离常数pKa与弱酸和弱碱pH的关系 污染物处于pH变化的水介质中，其吸收进入机体内在相当程度上受pH影响， 即在肠胃消化道内的酸碱反应。 由上述关系，pH影响弱酸和弱碱的水溶解度。此外，pH还能影响亲脂金属