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高中生物选修知识要点概括
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基因工程的基本操作程序
第一步:目的基因的获得
目的基因是指:编码蛋白质的构造基因。
原核基因采用直接分别获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。
3.PCR技术扩增目的基因
(1)PCR的含义:是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。
目的:获得大量的目的基因
原理:DNA双链复制
过程:
第一步:加热至90~95℃DNA解链为单链;
第二步:冷却到55~60℃,引物与两条单链DNA联合;
第三步:加热至70~75℃,热牢固DNA聚合酶从引物初步进行互补链的合成。
特点:指数(2^n)形式扩增
第二步:基因表达载体的建立(核心)
目的:使目的基因在受体细胞中牢固存在,并且能够遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
组成:目的基因+启动子+停止子+标记基因
启动子:是一段有特别构造的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶鉴识和联合的.部位,能驱动基因转录出mRNA,最后获得所需的蛋白质。
停止子:也是一段有特别构造的DNA片段,位于基因的尾端。
标记基因的作用:是为了判断受体细胞中可否含有目的基因,进而将含有目的基因的细胞精选出来。常用的标记基因是抗生素基因。
第三步:将目的基因导入受体细胞
转变的见解:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内保持牢固和表达的过程。
常用的转变方法:
将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术。方法的受体细胞多是受精卵。
将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是生殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是大肠杆菌,其转变方法是:
先用Ca2+办理细胞,使其成为感觉态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感觉态细胞混淆,在必然的温度下促进感觉态细胞吸取DNA分子,达成转变过程。
重组细胞导入受体细胞后,精选含有基因表达载体受体细胞的依照是标记基因可否表达。
第四步:目的基因的检测和表达
第一要检测转基因生物的染色体DNA上可否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交(DNA-DNA)技术。
其次还要检测目的基因可否转录出mRNA,方法是采用分子杂交(DNA-RNA)技术。
最后检测目的基因可否翻译成蛋白质,方法是采用抗原—抗体杂交技术。
有时还需进行个体生物学水平的判断。如生物抗虫或抗病的判断等。
一、传统发酵技术
果酒制作:
原理:酵母菌的无氧呼吸反响式:C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。
菌种根源:附着在葡萄皮上的野生酵母菌或人工培养的酵母菌。
条件:18-25℃,密封,每隔一段时间放气(CO2)
检测:在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反响呈灰绿色。
2、果醋制作:
原理:醋酸菌的有氧呼吸。
O2,糖源充分时,将糖分解成醋酸
O2充分,缺少糖源时,将乙醇变为乙醛,再变为醋酸。
C2H5OH+O2CH3COOH+H2O
条件:30-35℃,合时通入无菌空气。
3、腐乳制作:
菌种:青霉、酵母、曲霉、毛霉等,主若是毛霉(都是真菌)。
原理:毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和aa;脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
条件:15-18℃,保持必然的湿度。
菌种根源:空气中的毛霉孢子或优秀毛霉菌种直接接种。
加盐腌制时要逐层加盐,随层数加高而增添盐量,盐能控制微生物的生长,防范豆腐块腐败变质。
4、泡菜制作:
原理:乳酸菌的无氧呼吸,反响式:C6H12O62C3H6O3+能量
制作过程:①将清水与盐按质量比4:1配制成盐水,将盐水
煮沸冷却。煮沸是为了杀灭杂菌,冷却此后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。②将新鲜蔬菜放入盐水中后,盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水,以保证乳酸菌发酵的无氧环境。
亚硝酸盐含量的测定:①方法:比色法;
②原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反响后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐联合形成玫瑰红色染料。
基因突变和基因重组
一、生物变异的种类
1、不能遗传的变异(仅由环境变化惹起)
2、可遗传的变异(由遗传物质的变化惹起),包括:基因突变;基因重组;染色体变异
二、可遗传的变异
(一)基因突变
1、见解:DNA分子中发生碱基对的取代、增添和缺失,而惹起的基因构造的改变,叫做基因突变。
2、原因:物理因素:X射线、紫外线、r射线等;
化学因素:亚硝酸盐,碱基近似物等;
生物因素:病毒、细菌等。
3、特点:
宽泛性
随机性(基因突变能够发生在生物个体发育的任何时期;基因突变能够发生在细胞内的不同样的DNA分子上或同一DNA分子的不同样部位上)
低频性
多半有害性
不定向性
【注】体细胞的突变不能够直接传给
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