血清总胆汁酸循环酶法测定法.docx

优选文档 优选文档 PAGE PAGE7 优选文档 PAGE 血清总胆汁酸循环酶法测定法 实验原理 汁酸会被3-羟甾醇脱氢（3-HSD）以及-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）特异性地氧化，生成3-酮类固醇以及-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸复原型（Thio-NADH）。其他生成的3-酮类固醇在3-羟 甾醇脱氢（3-HSD）及-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还 原型（Thio-NADH）存在下，生成胆汁酸及-硫代烟酰胺 脲嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）。如上所述，依照循 环酶而放大微量的胆汁酸量，测定单位时间内生成的- 硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸复原型（Thio-NADH）在405nm 处的吸光度变化，以求得胆汁酸的浓度。 标本： 2.1病人准备：标本以空腹血清为宜，餐后胆汁酸会升 高，应注意采血时间。 2.2种类：血清、肝素或EDTA办理的血浆。应使用新鲜 标本。标本必定避光保留。 标本寄存4℃保留可牢固7天，-20℃保留可牢固3 个月。 标本运输常温条件下避光保留运输。 标本拒收标准细菌污染的标本。 实验资料 6.1试剂威特曼总胆汁酸测定试剂盒（试剂1：试剂2：） 6.1.1试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2试剂牢固性与储藏：试剂避光保留于2～8℃，若 无污染，可牢固至无效期。试剂不可以冰冻，试剂2必定 避光保留。 6.1.3变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊 度，或许未开盖的液体有积淀时，表示试剂已变质，不 能连续使用。 6.1.4注意事项：不前入口！防范接触皮肤及粘膜。应 采用必要的预防举措使用试剂 6.2校准品：使用威特曼企业供应的TBA校准品对自动 分析仪进行校准，详细拜会生化查验校准品和质控 品.SOP文件。 6.3质控品：详细拜会生化查验校准品和质控品.SOP文 件。 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪 操作步骤: 8.1项目基本参数：拜会AU2700生化分析仪项目测定参 .SOP文件 8.2仪器操作步骤：拜会AU2700生化分析仪操作规程.SOP 文件 查验结果的判断与分析 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警示限， 3S为失控限，绘制质控图，判断可否在控。质控规则参 见室内质控操作规程.SOP文件。 计算方法：以南京波因特企业供应的TBA校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可 靠的检测结果，以μmol/L报告。 12.参照值范围[2,3]：成年人：10μmol/L 参照值因性别、年纪、饮食和地区的不同样而有所差 别。依照好的实验室经验，每个实验室应成立自己的参 考值。 临床意义 操作性能 14.1 线 性范围：1.06～90μmol/L。 14.2 精 密度： 批内 x s 天间 x s CV CV 精巧度 (μ (μ 精巧度(μ (μ (%) (%) n=20 mol/L) mol/L) n=20 mol/L) mol/L) 4.4 样品1 7.0 0.22 3.14 样品1 7.2 0.32 4 2.7 样品2 20.8 0.43 2.07 样品2 22.4 0.62 7 1.9 样品3 50.4 0.88 1.75 样品3 52.4 1.01 3 14.3方法学比较：本企业的试剂盒(y)与某商品化试剂 盒(x)，同时对79个样品进行TBA检测，将检测结果作 方法学比较，其统计结果以下：y=0.999x+0.19μmol/L； r=0.999。 14.4敏捷度：本试剂的检测限为1.06μmol/L。 14.5病人结果可报告范围：1.06～90μmol/L。 高出范围结果办理本法的检测范围为1.06～90μ mol/L。当样品测定值高出上限时，应将样品用9g/L氯 化钠溶液作1+1稀释，从头测定，结果乘以2。 16.病危报警值的办理 17.方法限制性 17.1本法的检测范围为1.06～90μmol/L。当样品测定 值高出上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+1稀 释，从头测定，结果乘以2。 17.2搅乱物质：当样品中抗坏血酸浓度≤100mg/L，胆红 素≤50mg/L，血红蛋白≤5g/L，乳糜度≤3000度时没有 察看到搅乱。 拯救举措：当仪器发生故障时，快速联系仪器厂家进行维修。 参照文件 1.JungK,BohmM.Enzyme,23:201(1978) 2.HafkenscheidJCM,DijitCCM.Clin Chem,25(1):55(1979) TietzNW.Fundamentalsofclinicalchemistry,W.B.SaundersCo.,p674(1982) TsunodaT,EtoT,FurukawaM,NakataT,KusanoT,LinY,TashiroK,Wat