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[考纲要求]
1.基因工程的诞生( Ⅰ) 2.基因工程的原理及技术(含PCR 技术)( Ⅱ) 3.基因工程的应用( Ⅱ)
4.蛋白质工程( Ⅰ) 5 .植物的组织培养( Ⅱ) 6.动物细胞培养与体细胞克隆( Ⅱ) 7.细胞融
合与单克隆抗体( Ⅱ)
授课提示:对应学生用书第104 页
细节拾遗
1.教材选修3 P “寻根问底”:限制酶为何不切割自身DNA?
4
提示 :限制酶具有特异性,即一种限制酶只能识别一种特定的碱基序列,并在特定的位点上
进行切割;限制酶不切割自身DNA 的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列
已经被修饰。
2 .教材选修3 P “生物技术资料卡”:cDNA 文库的基因中为什么不含有启动子和内含子?
10
提示 :cDNA 文库是以某一发育时期细胞中的mRNA 为模板反转录形成的,mRNA 中不
有启动子和内含子对应的碱基序列。
3 .教材选修3 P “异想天开”:为什么到目前为止还没有生产出人类需要的蛋白质的结构?
27
提示 :因为蛋白质的高级结构非常复杂,人们对蛋白质的高级结构及其在生物体内如何行使
功能知之甚少。
4 .教材选修3 P “小知识”:说出植物组织培养的培养基组成。
36
提示 :一般由无机营养成分、有机营养成分、激素、琼脂四部分组成。
5 .教材选修3 P “生物技术资料卡”:病毒灭活的含义是什么?
52
提示 :灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但是并不破坏这些病原体的
抗原结构。
易错诊断
1.用限制酶能切割烟草花叶病毒的核酸( ×)
2 .如果要将人生长激素基因导入大肠杆菌,应从cDNA 文库中获取目的基因,或用人工化
学合成的方法获取( √)
3 .基因治疗是指将缺陷基因诱变为正常基因;基因诊断依据的原理是DNA 分子杂交;一种
基因探针能够检测水体中的各种病毒( ×)
4 .生物体内DNA 分子的解旋一定需要解旋酶,在体外则只需要高温( ×)
5 .愈伤组织的细胞排列整齐而紧密,且为高度液泡化、无定形状态的薄壁细胞( ×)
6 .同一株绿色开花植物不同部分的细胞经组织培养获得的愈伤组织细胞基因都是相同的( ×)
7 .在动物细胞培养与植物组织培养中,都需要对培养基灭菌,还都需要用到CO 培养箱( ×)
2
8.将B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,在培养液中融合后的细胞即为杂交瘤细胞
( ×)
授课提示:对应学生用书第105 页
考点 基因工程与蛋白质工程
1.基因工程常考的3 种基本工具
(1)限制性核酸内切酶:识别双链 DNA 分子的某种特定核苷酸序列,并在特定位点上切割
DNA 分子。
(2)DNA 连接酶:E·coli_DNA 连接酶只能连接黏性末端;T DNA 连接酶能连接黏性末端和
4
平末端。
(3)运载体:①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制;②有一个至多个限制酶切割位点;③具
有特殊的标记基因——以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。
2.基因工程的4大操作程序
(1)目的基因的获取(三种方法)
①从基因文库中获取。
②利用PCR技术扩增:其实质是在体外对目的基因进行大量复制,其过程如下:
③用化学方法人工合成。
(2)基因表达载体的构建(此为“核心步骤”)
①基因表达载体的组成
基因表达载体=目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点
②构建过程
注:目的基因插入位置:插入至启动子下游,终止子上游。
(3)将目的基因导入受体细胞的“3大方法”
①导入植物细胞——农杆菌转化法(花粉管通道法、基因枪法)。
②导入动物细胞——显微注射法(一般导入受精卵)。
2+
③导入微生物细胞——使用
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