天然药物化学成分的提取方法 (2).ppt

* ① 官能团的极性强弱 官能团 极性 R-COOH 大 Ar-OH R-OH R-NH2,R-NH-R’,R-N-R`2 R-CO-NR2 R-CHO R-CO-R’ R-CO-OR’ R-O-R’ 小 第六十二页，共一百二十页，2022年，8月28日 * ② 化合物的极性 化合物的极性则由分子中所含官能团的种类、数目及排列方式等综合因素所决定。 极性基团的数目愈多，化合物的极性越大，被吸附的性能就会更大些，在同系物中碳原子数目少些，被吸附也会强些。总之，只要两个成分在结构上存在差别，就有可能分离，关键在于条件的选择。 第六十三页，共一百二十页，2022年，8月28日 * ② 化合物的极性 被分离物质极性很小为不含氧的萜烯，或虽含氧但非极性基团，则需选用吸附性较强的吸附剂，并用弱极性溶剂如石油醚或苯进行洗脱。但多数中药成分的极性较大，则需要选择吸附性能较弱的吸附剂（一般Ⅲ～Ⅳ级）。 采用的洗脱剂极性应由小到大梯度递增，或可应用薄层层析以判断被分离物在某种溶剂系统中的分离情况。此外，能否获得满意的分离，还与选择的溶剂梯度有很大关系。 多组分的混合物，象植物油脂系由烷烃、烯烃、甾醇酯类、甘油三酸醋和脂肪酸等组份。当以硅胶为吸附剂时，使油脂被吸附后选用一系列混合溶剂进行洗脱，油脂中各单一成分即可按其极性大小的不同依次被洗脱。 第六十四页，共一百二十页，2022年，8月28日 * 2、吸附簿层色谱 薄层层析是一种简便、快速、微量的层析方法。一般将吸附剂撒布到平面如玻璃片上，形成一薄层进行层析时，即称薄层层析。 针对某些性质特殊的化合物的分离与检出，有时需采用一些特殊薄层。 第六十五页，共一百二十页，2022年，8月28日 * 特殊薄层 ① 荧光薄层 ② 络合薄层 ③ 酸碱薄层和PH缓冲薄层 第六十六页，共一百二十页，2022年，8月28日 * ① 荧光薄层 有些化合物本身无色，在紫外灯下也不显荧光，又无适当的显色剂时，则可在吸附剂中加入荧光物质制成荧光薄层进行层析。展层后置于紫外光下照射，薄层板本身显荧光，而样品斑点处不显荧光，即可检出样品的层析位置。 常用的荧光物质多为无机物。其一是在254nm紫外光激发下显出荧光的，如锰激化的硅酸锌。另一种为在365nm紫外光激发下发出荧光的，如银激化的硫化锌、硫化镐。 第六十七页，共一百二十页，2022年，8月28日 * ② 络合薄层 常用的有硝酸银薄层，用来分离碳原子数相等而其中C一C双键数目不等的一系列化合物，如不饱和醇、酸等。其主要机理是由于C-C键能与硝酸银形成络合物，而饱和的C-C键则不与硝酸银络合。因此在硝酸银薄层上，化合物可由于饱和程度不同而获得分离。层析时饱和化合物由于吸附最弱而Rf最高，含一个双键的较含两个双键的Rf值高，含一个三键的较含一个双键的Rf值高。 在一个双键化合物中，顺式的与硝酸银络合较反式的易于进行。因此，还可用来分离顺反异构体。 第六十八页，共一百二十页，2022年，8月28日 * ③ 酸碱薄层和pH缓冲薄层 为了改变吸附剂原来的酸碱性，可在铺制薄层时采用稀酸或稀碱以代替水调制薄层。例如硅胶带微酸性，有时对碱性物质如生物碱的分离不好，如不能展层或拖尾，则可在铺薄层时，用稀碱溶液0.1～0．5NNa0H溶液制成碱性硅胶薄层。例如猪屎豆碱在以硅胶为吸附剂时，以氯仿-丙酮-甲醇（8∶2∶1）为展开剂Rf＜0.1，采用碱性硅胶薄层用上述相同展开剂，Rf值增至0.4左右。说明猪屎豆碱为--碱性生物碱。 第六十九页，共一百二十页，2022年，8月28日 * 薄层层析法应用 ① 化学成分的预试 ② 化学成分的鉴定 ③ 探索柱层分离的条件 第七十页，共一百二十页，2022年，8月28日 * ① 化学成分的预试 用薄层层析法进行中草药化学成分预试，可依据各类成分性质及熟知的条件，有针对性地进行。由于在薄层上展层后，可将一些杂质分离，选择性高，可使预试结果更为可靠。 第七十一页，共一百二十页，2022年，8月28日 * ② 化学成分的鉴定 以薄层层析法进中草药化学成分鉴定，最好要有标准样品进行共薄层层析。如用数种溶剂展层后，标准品和鉴定品的Rf值、斑点形状颜色都完全相同，则可作初步结论是同一化合物。但一般需进行化学反应或红外光谱等一种仪器分析方法加以核对。 第七十二页，共一百二十页，2022年，8月28日 * ③ 探索柱层分离的条件 在进行柱层分离时，首先考虑选用何种吸附剂与洗脱剂。在洗脱过程中各个成分将按何种顺序被洗脱，每一洗脱液中是否为单一成分或混合体，均可由薄层的分离得到判断与检验。通过薄层的预分离，还可以了解多组分样品的组成与相对含量。如在薄层上摸索到比较满意的分离条件，即可将此条件用于干柱层析。 第七十三页，共一百二十页，20