还原型维生素C的测定.pdfVIP

还原型维生素C 的测定 维生素C 又称抗坏血酸，其纯品为白色无臭结晶，熔点为190～192℃，溶于水或乙醇 中，不溶于油剂。在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件下较稳定。还原 型 （L-抗坏血酸）可被氧化为氧化型 （L-脱氢抗坏血酸），还有一定的生理作用，如果进一步 水解则生成2，3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。总抗坏血酸包括还原型、氧化型抗坏血酸 和2，3-二酮古乐糖酸。 根据它具有的还原性质可以测定Vc 的含量。常用的测定方法有2，6-二氯靛酚法、2， 4-二硝基苯肼法、铅-硫化氢法、碘酸法以及荧光分光光度法。2，6-二氯靛酚法用于测定还 原型Vc，其它方法多用于测定总Vc 的含量。 方法原理 质 抗坏血酸 （VC）结构中有烯二醇结构存在，因此具有还原性，能将蓝色染料2，6-二氯 靛酚还原为无色的化合物，Vc 则被氧化为脱氢Vc，反应式如下 液 海 上 质 液 海 上 2，6-二氯靛酚具有酸碱指示及氧化还原指示的两种特性。在碱性介质中呈深蓝色，而 在酸性介质中呈浅红色（变色范围pH4～5），其氧化态时呈深蓝色（碱介质中）或浅红色（酸 质 性介质），还原态时为无色。根据这个特性，用碱性蓝色染料的标准溶液滴定植物样品酸性 浸出液中Vc 到刚变浅红色为终点，由染料的用量即可计算Vc 的含量。滴定终点的红色是刚 过量的未被还原的 （氧化型）染料溶液在酸性介质中的颜色。 液 通常测定Vc 浸提和测定都是在20g ·L-1 的草酸溶液中进行的，目的是保持反应时一定 的酸度，避免Vc 在pH 高时易被空气氧化 （阵）。此染料不致氧化待测液中非Vc 的还原性物 质，所以对Vc 的测定有一定的选择性。 海 本法适用于测定一般水果、蔬菜样品的还原型Vc，不包括脱氢Vc。如样品中含有Fe2+、 Sn2+、Cu2+、SO3 2—、S2O3 2— 、SO2 等还原性杂质，则有干扰。 上 主要仪器 高速组织捣碎机 （8000～12000r-min ）、电动离心机 （4000r*min-2）、半微量滴 定管。 试剂 （1）20g ·L-|草酸溶液。称取草酸 （化学纯）20g 溶于水中，稀释至1L，贮于避光处 （生2）。 （2）60gL-KI 溶液。 （3）10gL-|淀粉指示剂。 （4）0.1000mol ·L-1 （1/6KIO3）标准液。称取在105℃烘过2h 的碘酸钾 （KIO3），优级纯） 1.784g 溶于水，定容至500mL。此为0.1000mol ·L-I （1/6 KIO3）贮备液。使用时将此贮备 液用煮沸并冷却的水稀释100 倍，即成0.0010mol ·L 1/6KIO3）标准溶液。大约每星期应稀 释配制1 次。 （5）Vc 标准溶液。称取维生素C （C5H8O5，分析纯）20.0mg 溶于20g*L-|草酸溶液，并用 20g ·L-|草酸稀释至100mL，此液约含Vc0.2mg ·mL-|置于冰箱中保存。临用前当天进行标 定。 Vc 的标定吸取Vc 液5.00mL 于50mL 三角瓶中，加入20g ·L 一草酸溶液10mL，60g-L-KI 溶 质 液0.5mL，10g ·L~|淀粉溶液5 滴，用0.1000mol ·L-1 （1/6KIO3）标准液滴定至溶液突变为 浅蓝色