备课素材：土地利用方式对黑土区土壤微生物群落结构的影响课外实验-高二上学期生物人教版（2019）选择性必修2.docxVIP

课外实验：土地利用方式对黑土区土壤微生物群落结构的影响 一、实验方法? 1.1?样地设置与样品采集?? 将一块典型黑土退化农田划分为 3 个地块，采取不同的土地利用恢复方式，形成裸地、农田和草地三种生态系 统。具体设置如下： （1）草地（Grassland），无任何肥料投入或耕作，自然恢复为草原化草甸植被，植被自然生长还田，无人为干扰； （ 2 ）农田 （Cropland），采用传统耕作方式，不施用任何肥料以减少土壤继续退化程度； （3）裸地（Bareland），定期将作物地上部分铲除，保持无植被覆盖。作物收获后采集土壤样品，一部分用于测定土壤理化性质，一部分保存在–80℃冰箱用于土壤微生物测定。? 1.2 土壤理化指标测定?? 土壤含水量用干燥法测定，土壤 pH 用 pH 计测定，土壤有机质采用重铬酸钾氧化—外加热法测定，土壤全氮采用凯氏定氮法测定，土壤阳离子交换量使用醋酸铵法测定，土壤碱解氮用碱解扩散法测定，土壤有效磷用钼锑抗比色法测定，土壤速效钾用火焰光度法测定。 1.3 土壤微生物测序? ? 称取0.5 g土壤，提取土壤DNA，使用特异性引物，上游引物为 1132R（5-GGGTTGCGCTCGTTGC5- 3），下游引物为 1108F（5-ATGGYTGTCGTCAGCT CGTG-3），分析 16S rRNA 基因的拷贝数。使用引物为 515F （5-GTGCC