植物组织培养实验室的组成仪器设备及基本操作.pptVIP

2、微量元素： 植物组织的对其需要量极少，过多会产生毒害，如造成蛋白质变性、酶失活,代谢障碍等。 各种微量元素均具有特定的生理功能，如硼与蛋白质的合成及糖类的运输有关；铜能促进离体根的形成；锰参与植物的光合作用和呼吸作用；钼为氮素代谢的重要元素。 第三十一页，共七十三页。 第三十二页，共七十三页。 微量元素中，铁的用量较大，它对叶绿素的合成起重要作用，由于在较高pH下，FeCl3极易形成Fe（OH）3沉淀，难以被吸收，所以多用乙二胺四乙酸二钠盐与硫酸亚铁形成的螯合物，并且单独配制。 第三十三页，共七十三页。 第三十四页，共七十三页。 （二）有机成分： 主要包括各种维生素和氨基酸 常用的维生素：硫胺素（VB1）、吡哆醇（VB6）、烟酸（VB3）、泛酸钙（VB5）、生物素、钴胺素（VB12）、叶酸等。 常用的氨基酸：甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰氨、丙氨酸等。 有时添加水解乳蛋白或水解酪蛋白，为牛乳经酶法加工的水解产物，含有20种氨基酸的混合物，用量10－1000mg/L, 通常用于原生质体等培养。 此外肌醇是另外一种重要的有机成分，在维持离子平衡，糖类的转化中起重要作用，此外还参与磷脂代谢及等生理作用。它可以促进愈伤组织的形成，不定芽、不定胚的分化。 第三十五页，共七十三页。 第三十六页，共七十三页。 （三）植物生长调节物质： 植物激素是植物代谢中产生的天然化合物，它能直接影响植物细胞的分化、分裂以及影响植物的形态建成、开花、结实、成熟、衰老脱落、休眠、萌发等生理活动。 在植物组织培养中，主要通过植物激素及生长调节物质对离体的组织、器官的形态发生进行调控。包括诱导细胞分裂、愈伤组织的生长、根芽的分化以及体细胞胚胎发生等。 第三十七页，共七十三页。 常用的植物激素及生长调节物涉及五大类植物激素： 1、生长素类： 2、细胞分裂类： 3、赤霉素类： 4、脱落酸： 5、多胺 6、乙烯： 第三十八页，共七十三页。 1、生长素类： 组织培养中的功能是：促进细胞伸长生长和细胞分裂，诱导形成愈伤组织，促进生根。 常用的有NAA、IAA、IBA、2,4－D等。 第三十九页，共七十三页。 第四十页，共七十三页。 2、细胞分裂素类： 功能：诱导芽的分化、促进侧芽萌发；促进细胞分裂和扩大，促进茎增粗，抑制茎伸长；延缓衰老。 常用细胞分裂素有BA、KT、ZT、2ip等。 第四十一页，共七十三页。 第四十二页，共七十三页。 第四十三页，共七十三页。 此外近年来发现苯基脲衍生物具有非常高的细胞分裂素活性，在多种植物上应用。 如TDZ，CPPU，4－PU等。 第四十四页，共七十三页。 第四十五页，共七十三页。 3、赤霉素类： 主要具有诱导茎的细胞伸长，对根无效；对形成层细胞分化有影响，与生长素协同作用；可以诱导离体成花；打破休眠等功能。 常用GA3、GA4等。 第四十六页，共七十三页。 第四十七页，共七十三页。 4、脱落酸（ABA）： 促进休眠、衰老和脱落。组织培养中较少使用，主要用于种质资源的离体保存。 第四十八页，共七十三页。 第四十九页，共七十三页。 5、乙烯： 主要促进衰老和脱落，高浓度易形态变化。 第五十页，共七十三页。 第五十一页，共七十三页。 （四）碳源： 碳源主要为细胞提供合成新化合物的骨架，为细胞的呼吸代谢提供底物与能源，此外还能维持一定的渗透压。 常用的碳源主要是蔗糖，使用浓度在10－50g/L，此外果糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨糖、甘露糖及可溶性淀粉等也常用于植物组织培养。 第五十二页，共七十三页。 （五）琼脂： 琼脂作为固化剂用于组织培养中，起支持植物的作用，不提供营养，为海藻中提取的一种高分子化合物，仅溶于热水（90 oC以上），成为凝胶，冷却后（40 oC以下）即凝固为凝胶。 琼脂的用量通常在4～10g/L。 第五十三页，共七十三页。 植物组织培养实验室的组成、仪器设备及基本操作 第一页，共七十三页。 一、植物组织培养实验室的结构及设计要求： 完整的植物组织培养室通常包括洗涤室、化学实验室、接种室、培养室、细胞学实验室等部分。可以根据实际需要和条件进行设计。 但从功能上至少包括准备室（化学实验室）、接种室以及培养室三部分，并且按顺序排列。 在化学实验室与接种室之间应留有缓冲空间。 第一节 实验室结构、仪器设备及操作技术 第二页，共七十三页。 （一）准备室（化学实验室）： 1. 主要功能： 用于培养器皿的清洗、干燥、培养基的配制、分装和灭菌、试管苗的出瓶及整理等工作。 第三页，共七十三页。 2. 主要仪器设备及用品