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T细胞斑点试验会计学第1页/共16页结核感染T细胞斑点检测T细胞斑点试验（T-SPOT），又叫作结核感染干扰素释放试验（Interferon Gamma Release Assays，IGRAs 结核的现状第2页/共16页 结核病是全球严重的公共卫生问题之一。据WHO统计，全球约有20亿人感染结核分枝杆菌，每年有约200万人死于结核。 我国是世界上22个结核病高负担国家之一，结核感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的2倍以上。第3页/共16页基于T淋巴细胞检测结核感染的原理在诊断结核感染方面具有良好的敏感性和特异性，在现有结核诊断方法存在缺陷的今天， 可以给临床诊断提供参考。基于结核抗原特异性T细胞向病变部位集中的特点， 的检测物已不局限于静脉血，支气管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等也可用于对肺内及肺外结核的诊断。T-SPOT的意义第4页/共16页1:菌阴，结核病患者的辅助诊断2：肺外结合的鉴别诊断3：免疫力低下/受抑制患者的结核诊断/感染筛查4：儿童结核病的辅助诊断第5页/共16页T-SPOT注意事项1:肝素抗凝全血，常温保存,不得冷冻或冷藏。2:采血量：三岁以下2ML，3-9岁4ML，9岁以上6ML，免疫力低下或白细胞低下采6ML（本公司一律两管）3:样本必须4小时内送达。4：输血受试者或PET-CT受试者，两周后检测。5：受试者需阅读知情同意书并填写申请单。基于T淋巴细胞检测结核感染的原理第6页/共16页第7页/共16页结核的传统诊断手段结核菌素皮试：低敏感性：免疫力低下人群中其敏感性大大降低。低特异性：与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉，易造成“假阳性”结果。细菌学检查：常规培养：2月；快速培养：1周； 阳性率取决于采集标本中细菌数量，不利于早期诊断。病理学检查：阳性率低，对取材标本有较高要求，有创伤，对肉芽肿性病变需进一步鉴别。第8页/共16页基于T淋巴细胞检测结核感染的原理结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结核感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放r干扰素r干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中最重要的细胞因子第9页/共16页基于T淋巴细胞检测结核感染的原理技术：利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（PBMC）中存在结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异 抗原刺激后分泌r干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。检测外周血中受结核特异抗原刺激释放r干扰素的T淋巴细胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统 对斑点进行计数，1个斑点代表一个细胞，计算出抗原特异性细胞的频率。第10页/共16页基于T淋巴细胞检测结核感染的原理空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑点数大于20时视为试验有效试验结果用每106 PBMCs中斑点形成细胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106 PBMCs基于T淋巴细胞检测结核感染的原理第11页/共16页包第12页/共16页基于T淋巴细胞检测结核感染的原理第13页/共16页的临床意义高灵敏度 第14页/共16页提 问出报告时间：一、三、五检测三个工作日出。标本类型：肝素抗凝全血两管需注意:4小时内送检，8小时内完成检测价格：660元方法学：酶联免疫斑点法英文：T-SPOT第15页/共16页Thank You !