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会计学1RNA生物合成和加工 遗传信息传递的 中心法则蛋白质翻译转录逆转录复制复制DNARNA第1页/共83页 第一节 DNA指导下RNA的合成 转录（transcription）：生物体以DNA为模板合成RNA的过程，转录是通过DNA的指导下的RNA聚合酶的催化实现的。经转录生成的RNA有多种，主要的是rRNA，tRNA，mRNA，snRNA 和 scRNA。 转录从DNA模板的特定位点开始，并在一定的位点终止,此转录区域为一个转录单位。 转录的起始是有DNA的启动子（promoter)控制的，控制中止的部位称中止子（terminator)。第2页/共83页 1. DNA指导的RNA聚合酶反应式： n1ATP RNA polymerase n2GTP n3CTP DNA, Mg2+(or Mn2 +) n4TTP RNA +(n1+n2+n3+n4)PPi从聚合反应的化学本质、极性和模板的使用这三方面来说，转录与复制是相同的。但是，也存在三个主要不同点： A．转录中不需要RNA引物、以4种三磷酸核糖核苷（NTP）为 底物 ； B．转录反应一般只用一小段DNA做模板； C．在转录区，一般都只有一条DNA链可以作为模板。 第3页/共83页 启动子 终止子 模板链（负链，反意义链）编码链（正链，有意义链）非信息区DNA5′5′3′3′两股DNA单链中只有一股可转录,可作为模板转录成RNA的一股称为模板链,对应的一股互补链称为编码链。能转录出mRNA然后指导蛋白质合成的部分称为结构基因。其余的DNA可能转录(rRNA,tRNA),也可能不转录。不对称转录:DNA分子上一股可转录,另一股不转录;模板链并非永远在同一单链上。第4页/共83页 大肠杆菌RNA聚合酶（456 kD)??????核心酶(α2ββ?)起始因子α—— 酶的装配与启动子上游元件和活化因子结合ββ?s—— 识别启动子，促进转录的起始w ---?全酶(α2ββ? ?) w2 Zn结合核苷酸底物催化磷酸二酯键形成和模板DNA结合催化中心第5页/共83页 转录泡，17bp杂交体，8bp酶的移动方向大肠杆菌RNA聚合酶进行的转录第6页/共83页 RNA合成过程起始双链DNA局部解开磷酸二酯键形成终止阶段解链区到达基因终点延长阶段5?3??RNA 启动子（promoter) 终止子(terminator)5??RNA聚合酶?5??3?5??3?5?5?3?NusA离开识别NusA第7页/共83页 真核生物的RNA聚合酶 三种RNA聚合酶Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,它们专一地转录不同的基因,其转录过程和产物各不相同。三种RNA聚合酶对鹅膏覃碱的敏感性反应不同。 snRNA U6, scRNAr 5s-rRNA第8页/共83页 2.启动子和转录因子 启动子( promoter)是指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列。 RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子（蛋白质）称为转录因子(transcriptional factor)。 利用足迹法(footprint)和DNA测序法可以确定启动子的序列结构。 第9页/共83页 足迹法确定启动子序列第10页/共83页 第11页/共83页 大肠杆菌启动子共有序列××AGTCTTGACA××××××××××××××××××TAT××××××××××××××ATAAAT××××××AACTGT××××TTA××××××××××××××××Pribnow框-10-35识别区16-19bp5-9bp起点频度： T89 A95 T45 A60 A50 T95有助于DNA局部双链解开提供了RNA聚合 酶识别的信号频度：T82 T84 G78 A65 C54 A45第12页/共83页 真核启动子分为类型I、II、III，分别由RNA pol I、II、III进行转录。类型I、III启动子种类有限，分别控制rRNA前体基因和小分子RNA的转录。类型I(RNA聚合酶I)启动子控制rRNA前体基因的转录，转录产物经加工后生成各种成熟的rRNA。第13页/共83页 类型I启动子由两部分保守序列组成：核心启动子位于转录起始点附近（－45—＋20）。上游控制元件（UCE）位于－180—－107。两部分都富含GC。 RNA聚合酶I的转录还需要两种辅助因子参与: U