中护微生物实验细菌的人工培养学习.pptxVIP

会计学第1页/共25页实验目的了解人工培养基的制作。了解细菌的接种方法 分离培养方法——平板划线法 （混合菌液）了解细菌的生长现象与代谢产物液体、固体、半固体培养基乳糖发酵实验硫化氢实验第2页/共25页实验内容琼脂平板的制作 紫外线杀菌实验 咽拭实验 分组实验 皮肤消毒实验 空气中细菌计数实验 药敏实验 常用消毒器械的介绍 第3页/共25页 一、人工培养基的制备和种类1.制备原则2.制备程序 3.常用培养基的分类 1.制备原则第4页/共25页（1）适当的营养成分；（2）合适的酸碱度；（3）配制后经灭菌使之无菌，方可应用。 第5页/共25页2.制备程序配料→熔化→测定及矫正PH→滤过→分装→灭菌→备用第6页/共25页3.常用培养基的分类（一）按物理性状分：液体培养基固体培养基: 1.5～2.5% 琼脂 半固体培养基: 0.3～0.5%琼脂（二）按用途不同可分：基础培养基；营养培养基；选择培养基；鉴别培养基；厌氧培养基。第7页/共25页二.细菌接种法1.平板培养基接种法（操作） 2.斜面培养基接种法（示教） 3.液体培养基接种法（示教） 4.半固体培养基接种法（示教） 第8页/共25页 1.平板培养基接种法（操作）密集划线法 分区划线法 接种大肠杆菌接种枯草杆菌第9页/共25页uv30’培养箱班级、姓名/学号、大肠 枯草第10页/共25页第11页/共25页培养基的用途菌落 液体：增菌、纯培养固体平板：用于分离培养半固体：动力、保存菌种第12页/共25页三.细菌生长现象及代谢产物观察（示教）1.细菌在培养基中的生长现象（1）液体培养基：混浊、菌膜和沉淀。（2）固体培养基：菌落和菌苔。（3）半固体培养基：沿穿刺线生长，穿刺线清晰，周围培养基仍为透明，动力阴性；穿刺线向周围扩散生长，穿刺线模糊，整个培养基变成混浊，动力阳性。2.细菌的代谢产物观察（1）细菌对糖分解产物观察（2）细菌对氨基酸分解产物观察（1）液体培养基第13页/共25页均匀混浊生长（葡萄球菌）菌膜形成（枯草芽孢杆菌）沉淀生长（链球菌）第14页/共25页（2）固体培养基形成菌落和菌苔。观察菌落的大小、形态、透明度、颜色、表面和边缘情况及菌落周围有无溶血环等。第15页/共25页（3）半固体培养基可用于观察细菌有无动力。痢疾志贺菌沿穿刺线生长，穿刺线清晰，周围培养基仍为透明，动力阴性；大肠埃希菌沿穿刺线向周围扩散生长，穿刺线模糊，整个培养基变成混浊，动力阳性。第16页/共25页2.细菌的代谢产物观察（1）细菌对糖分解产物观察 方法：将大肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种于葡萄糖、乳糖发酵培养基中，置37度24小时培养后观察结果。结果：大肠埃希菌分解葡萄糖、乳糖，产酸产气； 伤寒沙门菌分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖。第17页/共25页糖发酵试验2.细菌的代谢产物观察第18页/共25页（2）细菌对氨基酸分解产物观察 靛基质试验：分别接种大肠埃希菌和伤寒沙门菌于蛋白胨水培养基（含色氨酸）内，置37度24小时培养后，然后沿管壁徐徐加入靛基质试剂（对二甲基醛）数滴，静置片刻，在两液界面出现红色环者为靛基质试验阳性（大肠埃希菌），无红色环者为阴性（伤寒沙门菌）。第19页/共25页生化反应——Indol实验Indol实验第20页/共25页2.细菌的代谢产物观察（2）细菌对氨基酸分解产物观察硫化氢试验：将细菌接种于含有硫酸亚铁或醋酸铅的培养基（如双糖培养基）中，若细菌分解培养基中含硫的氨基酸产生硫化氢，硫化氢可与硫酸亚铁或醋酸铅反应，生成黑色的硫化铁或硫化铅沉淀，为硫化氢试验阳性（乙型副伤寒沙门菌），若细菌不能分解含硫的氨基酸则无黑色沉淀形成，为硫化氢试验阴 （大肠埃希菌）。第21页/共25页H2S试验第22页/共25页第23页/共25页肠道杆菌在KI培养基上的培养特性实验报告第24页/共25页观察记录细菌在培养基上的生长现象和代谢产物。