血液病分子病理诊断.pptVIP

* * NPM1+预后好 NPM1+FLT3-预后好 CEBPA阳性预后好 * * 淋巴细胞从原始的胚系构型到分化成熟，其抗原受体（IGH和TCR）基因通过基因 重排而形成有功能的基因。由于V、D、J、C组合上的多样性，连接位点的多样性， 连接区插入多样性和体细胞突变等原因，每个淋巴细胞的抗原受体基因(IgH和TCR) 编码完全不同，序列长短不一，故从正常人的外周血和骨髓以及炎性病变的淋巴结 中提取的DNA应用PCR法扩增后在凝胶电泳上呈现弥散涂片状(smean，不能形成 单一的条带，而恶性淋巴系统病变是由某一个T或B淋巴细胞在发育过程中发生了 分化阻滞，造成恶性转化，继之单克隆增殖形成，其DNA重排结构是一致的，PCR 扩增后经凝胶电泳呈单一条带。据此可区别有无恶性淋巴系统增殖性改变。 * 通过荧光原位杂交技术（ FISH ）技术，分析CLL中主要预后相关染色体和基因异常，有助于CLL治疗方案选择和预后提示。 目前研究表明：（1）p53基因缺失，中位生存期约为32个月；（2）ATM缺失，中位生存期约为79个月；（3）12号三体，中位生存期约为114个月；（4）13q14 （D13S25）缺失，中位生存期约为133个月；比正常染色体核型组预后要好，因为病程发展慢（5）Rb1缺失，中位生存期约为133个月；（6）正常FISH组合结果，中位生存期约为111个月。 * * BCR/ABL融合基因 +敏感 FIP1L1/PDGFRa融合基因 +敏感 C-KIT突变 D816V不敏感 其他Exon9-11-13-17突变 胃肠道间质瘤 * 慢性淋巴细胞白血病CLL 探针名称 位点及读取 异常率 意义 中位生存期(月) p53 17p13缺失 7-8% 预后很差　　 32 ATM 11q22.3缺失 11-18% 预后差　 79 12cen 12p11.1-q11 三体 16-25% 预后中等　　 114 RB1 13q14缺失 36-64% 预后好　 133 D13S25 13q14缺失 36-64% 预后好　　 133 第二十四页，共四十四页。 各细胞遗传学亚组CLL患者生存期（n=325） 32 79 114 111 133 D?hner H, Engl J Med. 2000;43:1910-1916. 第二十五页，共四十四页。 酪氨酸激酶抑制剂TKI BCR/ABL融合基因 FIP1L1/PDGFRa融合基因 基因检测个体化用药 第二十六页，共四十四页。 基因检测个体化用药 2012NCCN 第二十七页，共四十四页。 ABL激酶突变检测 ABL激酶区突变c.763GA(p.E255K)和c.944CT(p.T315I)。 第二十八页，共四十四页。 WT1表达量检测 *约75%AML患者可检测到WT1高水平表达，WT1是AML患者常用的MRD检测标志 融合基因定量检测 MRD监测 *Current Opinion in Oncology 2010, 22:656–663 第二十九页，共四十四页。 WT1 (Wilm’s tumor gene) 1.WT1基因在各类型白血病中均能表达(ALL，AML，CML，MDS). 2.表达水平与白血病的进程相关，可作为化疗和骨髓移植后MRD检测敏感指标。 3.鉴别白血病与反应性白细胞增高。 第三十页，共四十四页。 初诊 B-ALL; MLL-AF4 t(4;11)(q21;q23) WT1 (Wilm’s tumor gene) 弟供姐 异基因 造血干细胞移植 +14d白细胞植活 +27d血小板植活 第三十一页，共四十四页。 嗜血细胞综合征相关基因突变 PRF1、UNC13D、STXBP2、STX11、SH2D1A、XIAP LYST、AP3B1、RAB27A 范可尼贫血基因突变 FANCA 60% 、FANCC 15% 、FANCG 10% WASP综合征 纯红再障 RPS19 先天性角化不良 DKC1、NHP2、TERC、TERT、NOP10、TINF2 血液遗传病分子检测 第三十二页，共四十四页。 PRF1 10q21-10q22 细胞杀伤功能缺陷 嗜血细胞综合征 Perforin 第三十三页，共四十四页。 FANCA 16q24.3 FANCC 9q22.3 范可尼贫血基因检测 Exon1 Itron4 Exon5 Exon6 Exon14 Q13X IVS4+4AT c.637_643delTACCGCC R185X R548X L554P 第三十四页，共四十四页。 RPS19 19q13.2 hot s