菌落总数的测定方法.pptxVIP

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会计学;食品微生物检验的指标;食品微生物检验的指标 ;一﹑菌落总数的概念 ;二﹑菌落总数的测定意义;三﹑菌落总数的测定方法;(二)仪器设备 培养基箱,恒温水浴锅,天平,三角瓶,灭菌培养皿,灭菌试管,玻璃珠,均质机,灭菌刀,镊子;酒精灯。 (三)培养基和试剂  1.营养琼脂培养基:按GB 4789.28中4.7规定。 2.磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。 3.生理盐水。 4.75%乙醇。 ;(四)检验程序 菌落总数的检验程序如下 ; (五)操作步骤 (一)、 检样稀释及培养 (1)以无菌操作,将检样25g(或mL)剪碎放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。 固体检样在加入稀释液后,最好置均质器中以8 000~10 000r/min的速度处理1min,做成1∶10的均匀稀释液。 (2) 用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管,混合均匀,做成1∶100的稀释液。 ;(3) 另取1mL灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支1mL灭菌吸管。 (4) 根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。 (5) 稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基(可放置于46±1℃水浴保温)注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。 (6) 待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h。 ; (二)、 菌落计数方法 ;2、菌落总数的快速测定方法;(2)一般食品选3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将检验纸片放在水平台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的圆圈内,轻轻将上盖膜放下,精置5min? (3)从中间向周围轻轻推刮,使水分在圆圈内均匀分布,并将气泡赶走。 (4)将加了样的检验纸片每6片叠放在仪器,放入自封袋中,平放在37℃培养箱内培养15~24h。取出纸片观察结果。 ?;谢谢大家!

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