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实验四糖发酵实验会计学第1页/共14页一、目的要求1.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。2.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。第2页/共14页二、基本原理 糖发酵试验是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。二、基本原理第3页/共14页酸的产生可利用指示剂来断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫（黄色）（紫色）]，当发酵产酸时，可使培养基由紫色变为黄色。气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。 第4页/共14页三、实验材料1.大肠杆菌，普通变形杆菌（ Proteus vulgaris）斜面各1支；2.盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各3支（内装有倒置的德汉氏小管），试管架，接种环等。第5页/共14页图1 糖类发酵试验 四、操作步骤第6页/共14页1、编号 用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。2、接种 取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支，按编号1支接种大肠杆菌，另1支接种普通变形杆菌，第3支不接种，作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支，同样1支接种大肠杆菌，1支接种普通变形杆菌，第3支不接种，作为对照。3．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37℃温室中培养24小时。第7页/共14页注意事项：接种后应轻轻摇动试管，使其均匀，防止倒置的小管进入气泡。否则会造成假象，得出错误答案。第8页/共14页第9页/共14页第10页/共14页观察结果:第11页/共14页观察结果时，看各管颜色变化及杜氏小管有无气泡。产酸产气用“⊕”表示；只产酸不产气用“+”表示；不产酸也不产气用“—”表示。第12页/共14页第13页/共14页思考题： 假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵试验应该出现什么结果？