TNAIA 005-2020 瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定 气相色谱法.pdfVIP

ICS 65.02 B40 团 体 标 准 T/NAIA 005—2020 瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定 气相色谱法 Determination of volatile fatty acids in rumen fluid Gas chromatography 2020-07-07发布 2020-08-01实施 宁夏化 分析测试协会 发 布 前 言 本标准的编写格式符合 GB/T 1.1-2009 《标准化工作导则 第 1 部分 标准的结构和编写》 规定编写。 本标准由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本标准由宁夏大学、宁夏饲料工程技术研究中心、宁夏兽药饲料监察所、宁夏昊标检测服 务研究院、宁夏化学分析测试协会起草。 本标准主要起草人：辛国省、卜姣姣、佐婷婷、刘辉、燕翀、杨仪、丁园、高巧仙、武晓 宏、谢荣国、张小飞、王京、杨洁。 本标准为首次发布。 1 瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定 气相色谱法 1　范围 本标准规定了瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定气相色谱法。 本标准适用于瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定。 2　规范性引用文件 下列文件中的条款通过在本标准中的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件， 其随后所有的修改单 (不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准 达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本 适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 602 化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备 3　原理 利用挥发性脂肪酸易溶于水的特点，用偏磷酸除去可溶性蛋白质，直接进样，用外标法定 量测定挥发性脂肪酸的含量。 4　试剂与材料 4.1　偏磷酸。 4.2　乙酸。 4.3　丙酸。 4.4　丁酸。 4.5　戊酸。 4.6　异戊酸。 4.7　25%偏磷酸溶液：称取 25g 溶于 100mL 水中。 4.8　4.8 标准储备液：称取乙酸（4.2）1250mg、丙酸（4.3）750mg、丁酸（4.4）500mg、戊 酸（4.5）500mg、异戊酸（4.6）500mg 标准品 (均为色谱纯或更高级别)，用水定容至250mL， 浓度分别为 5mg ∕mL、3mg ∕mL、2mg ∕mL、2mg ∕mL、2mg ∕mL。置于 4℃冰箱保存，有效期为 3 个月。 5　仪器和设备 5.1　分析天平：感量 0.0001g。 2 5.2　气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（FID）。 5.3　高速台式离心机。 5.4　漩涡振荡器。 6　瘤胃液的采集与保存 瘤胃液的采集在晨饲前进行，方法有两种，一种是通过瘤胃瘘管进行采集，另一种是采用特定的 胃管通过食道插入瘤胃进行采集。将采集好的瘤胃液用4层纱布过滤装入离心管或其他相当的容器封口 后放入液氮或-80℃冰箱保存。 7　测定步骤 7.1　试样制备与保存 取经4层纱布过滤后的瘤胃液1.00mL，置于离心管中，加入25%的偏磷酸溶液200 μL，涡旋混匀摇 匀，10000r∕min离心10min，上清液经0.45 μm滤膜过滤装人进样小瓶待测。 7.2　色谱条件 色谱柱：DB-FFAP毛细管柱（30m×0.32mm×0.25 μm），或性能相当；