TNAIA 051-2021 枸杞清汁(浆)中甜菜碱含量的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS 67.160.10 X 62 TB 团 体 标 准 T/ NAIA 051-2021 枸杞清汁(浆)中甜菜碱含量的测定 高效液相色谱法 Determination of betaine in lycium barbarum juice (pulp)-HPLC method 2021-05-30 发布 2021-06-01 实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规则起草。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位：宁夏菲杰特检测有限公司、宁夏早康枸杞股份有限公司、宁夏化学分析测试协会。 本文件主要起草人：王欢、张海星、吴秀玲、李亚辉、林桦、张小飞。 枸杞清汁（浆）中甜菜碱含量的测定 高效液相色谱法 范围 本文件规定了枸杞清汁（浆）中甜菜碱含量的测定方法。本文件适用于枸杞清汁（浆）中甜菜碱含量的测定。 本方法取样量为 1g 时，检出限为 0.001g/100g。 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682-2008 《分析实验室用水规格和试验方法》 NY/T 2947-2016 《枸杞中甜菜碱含量的测定 高效液相色谱法》 原理 试样中甜菜碱组分经甲醇-水溶液的混合溶液提取后，用混合型阳离子交换固相萃取柱净化，再用乙腈-水溶液定容，利用高效液相色谱法检测，保留时间定性，外标法定量。 试剂与材料 试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 中规定的一级水。 4.1.1 氨水(NH3·H2O)：含量为 25%~28%，优级纯。 盐酸(HCl)：含量为 36%~38%，优级纯。 甲醇(CH3OH)：色谱纯。 乙腈(CH3CN)：色谱纯。 试剂配制 盐酸溶液 c(HCl)=0.1mol/L:准确吸取 9mL 浓盐酸，加适量水并稀释定容至 1000mL。 甲醇-水溶液(25+75):取 25mL 甲醇慢慢加入 75mL 水中。 甲醇-水溶液(85+15):取 85mL 甲醇慢慢加入 15mL 水中。 氨化甲醇溶液(5+95):取 5mL 浓氨水慢慢加入 95mL 甲醇中。 乙腈-水溶液(75+25):取 75mL 乙腈慢慢加入 25mL 水中。 标准品 甜菜碱标准品（C5H11NO2，CAS 号：107-43-7）：纯度≥98.0%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。 标准溶液配制 甜菜碱标准储备液溶液：准确称取甜菜碱标准物质 100mg（精确到 0.0001g）用乙腈- 水溶液(4.2.5)溶解并定容至 10.0mL，配制成 10.0mg/mL 标准储备液，0℃~4℃贮存。 甜菜碱标准系列工作溶液：准确吸取标准储备液 0μL、20μL、50μL、100μL、200μL、500μL、1000μL、2000μL 至 10mL 容量瓶中，用乙腈-水溶液(4.2.5)定容至刻度，配制成质量浓度分别为 0g/100mL 、0.002g/100mL 、0.005g/100mL 、0.01g/100mL 、0.02g/100mL 、0.05g/100mL、0.1g/100mL、0.2g/100mL 的标准系列工作溶液。 4.5 材料 一次性微孔滤头：0.45μm，有机相。 塑料离心管：50mL。 阳离子交换固相萃取小柱：混合型阳离子交换固相萃取柱，基质为聚苯乙烯一二乙烯基苯高聚物，150mg/6mL，或相当者。使用前依次用 5mL 甲醇、5mL 0.1mol/L 盐酸溶液活化平衡。 仪器与设备 液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.2 分析天平：感量 0.001g 和 0.0001g。 离心机：转速≥3500r/min。 涡旋混合器。 涡旋振荡器。 旋转蒸发仪。 试样制备 取多个预包装的枸杞清汁（浆）样品直接混合，-18℃冷冻备用。 分析步骤 提取 称取枸杞清汁（浆）1g（精确到 0.001g）于 50mL 离心管中加入 25.0mL 甲醇-水溶液(4.2.2)，涡旋混匀 1min，置于涡旋振荡器中振荡 30min，3500r/min 离心 5min，取上清液备用。 净化 吸取上清液 5.00mL 转入已活化平衡的混合型阳离子交换固相萃取柱中，控制流速 1 滴 /s，待样液进入萃取小柱的吸附层后，依次用 5mL 甲醇-水溶液(4.2.3)、5mL 甲醇进行淋洗， 弃去淋洗液，最后用 5mL 氨化甲醇溶液(4.2.4)，洗脱并收集，重复洗脱一次，将洗脱液旋转浓缩至近干，用 2mL 乙腈