TNAIA 002-2020 发酵饲料中乳酸含量的测定 高效液相色谱法.pdfVIP

ICS 65.120 B46 团 体 标 准 T/NAIA 002—2020 发酵饲料中乳酸含量的测定 高效液相色谱法 Determination of lactic acid content in fermented feeds High performance liquid chromatography 2020-07-07发布 2020-08-01实施 宁夏化 分析测试协会 发 布 前 言 本标准的编写格式符合 GB/T 1.1-2009 《标准化工作导则 第 1 部分 标准的结构和编写》规 定编写。 本标准由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本标准由宁夏大学、宁夏饲料工程技术研究中心、宁夏兽药饲料监察所、宁夏饲料工作站、 宁夏农林科学院、宁夏昊标检测服务研究院、宁夏化学分析测试协会起草。 本标准主要起草人：辛国省、刘辉、卜姣姣、燕翀、杨仪、丁园、高巧仙、王建林、武晓 宏、谢荣国、张小飞、张艳、王京、杨洁。 本标准为首次发布。 1 发酵饲料中乳酸含量的测定 高效液相色谱法 1　范围 本标准规定了发酵饲料中乳酸含量高效液相色谱法。 本标准适用于发酵饲料中乳酸含量的测定。 本方法定量限：800mg/kg。 2　规范性引用文件 下列文件中的条款通过在本标准中的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其 随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于 本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 601 化学试剂 标准滴定溶液的制备 GB/T 14699.1 饲料 采样 3　原理 利用乳酸易溶于水的特点，乳酸加水超声提取后，稀释至适当的浓度，试液过滤膜进高效液 相色谱仪经C18色谱柱分离，在 210nm 波长下紫外检测器检测，外标法计算乳酸的含量。 4　试剂与材料 除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 4.1　乙腈（色谱纯）。 4.2　磷酸（色谱纯）。 4.3　0.1%磷酸溶液：准确吸取 1.0mL 磷酸（4.2）溶于水中，定容至 1000mL。 4.4　氢氧化钠。 4.5　0.1mol/L 氢氧化钠标准滴定溶液，按 GB/T601 配制和标定。 4.6　酚酞。 4.7　1%酚酞指示剂溶液：1g 酚酞溶于 60mL95%乙醇中，用水稀释至 100mL。 5　仪器和设备 5.1　分析天平：感量 0.0001 g。 2 5.2　超声波清洗器。 5.3　微孔滤膜：孔径 0.45um。 5.4　容量瓶：50mL、100mL、1000mL。 5.5　高效液相色谱仪（配有紫外检测器）。 6　试样制备与保存 按GB/T 14699.1规定，取代表性的样品1kg，四分法缩减取200g装入磨口瓶中备用。 7　测定步骤 7.1　样品溶液制备 称取试样 1g～5g，置于100mL容量瓶中，加60mL水，在50℃水浴中超声提取20min，冷却至室温， 用水定容至刻度，摇匀，过滤。取滤液稀释，使最后稀释液中乳酸的浓度均在工作曲线之内，取部分 稀释液过0.45 μm 滤膜，滤液作为试样溶液。 7.2　高效液相色谱条