生物传感器在食品检测中的应用.pptVIP

1.惰性载体——物理吸附法 此法是酶分子通过极性键、氢键、疏水力或π电子相互作用等吸附于不溶性载体上． 常用的载体有：多孔玻璃、活性炭、氧化铝、石英砂、纤维素酯（包括硝酸纤维素、醋酸纤维素）、葡聚糖、琼脂精、聚氯乙烯、聚苯乙烯等. 已用此法固定化的酶如：脂肪酶、α－D葡萄糖苷酶、过氧化物酶等． 第二十九页，共五十八页，2022年，8月28日 2.离子载体—交换法 选用具有离子交换剂的载体，在适宜的pH下，使酶分子与离子交换剂通过离子键结合起来，形成固定化酶．常用的带有离子交换剂的载体如下DEAE一纤维素、TEAE一纤维素、AE—纤维素、CM—纤维素、DEAE一葡萄糖、肌酸激酶等． 3．活化载体—共价结合法 a.重氮法 b.迭氮法 c.卤化氰法． d.缩合法 e.烷基化法 第三十页，共五十八页，2022年，8月28日 4.物理包埋法 此法是将酶分子包埋在凝胶的细微格子里制成固定化. 常用的凝胶有：聚丙烯酸胺、淀粉、明胶、聚乙烯醇、海藻酸钙、桂树脂等． 用凝胶包埋法制备的固定化酶如：木瓜蛋白酶、纤维素酶、乳酸脱氢酶等． 第三十一页，共五十八页，2022年，8月28日 酶传感器 它将活性物质酶覆盖在电极表面,酶与被测的有机物或无机物反应,形成一种能被电极响应的物质。 例如,脲在尿素酶催化下发生反应 1967年Updick和Hicks将固定化的葡萄糖氧化酶膜结合在氧电极上,做成了第一支葡萄糖电极；此后,这类酶传感器通常是通过检测产物H2O2的浓度变化或氧的消耗量来检测底物。 第三十二页，共五十八页，2022年，8月28日 第三十三页，共五十八页，2022年，8月28日 葡萄糖电极缺点: (1)溶解氧的变化可能引起电极响应的波动; (2)由于氧的溶解度有限,当溶解氧贫乏时,响应电流明显下降而影响检测限; (3)传感器响应性能受溶液pH值和温度影响较大 第三十四页，共五十八页，2022年，8月28日 第二代生物传感器,即介体型生物传感器,常用媒介体有铁氰化物、有机染料、醌及其衍生物、导电有机盐类和二茂铁及其衍生物。 最近,人们更关注酶与电极之间的直接电子传递研究,并用于构造第三代生物传感器 依据信号转换器的类型,酶传感器大致可分为酶电极(主要包括离子选择电极、气敏电极、氧化还原电极等电化学电极)、酶场效应晶体管传感器(FET-酶)和酶热敏电阻传感器等 第三十五页，共五十八页，2022年，8月28日 第三十六页，共五十八页，2022年，8月28日 3.3 微生物传感器(MicroorganismSensor) 微生物传感器分为两类： 一类是利用微生物在同化底物时消耗氧的呼吸作用；另一类是利用不同的微生物含有不同的酶。 好氧微生物在繁殖时需消耗大量的氧,可以氧浓度的变化来观察微生物与底物的反应情况。 第三十七页，共五十八页，2022年，8月28日 装置是：由适合的微生物电极与氧电极组成。 原理是：利用微生物的同化作用耗氧,通过测量氧电极电流的变化量来测量氧气的减少量,从而达到测量底物浓度的目的. 第三十八页，共五十八页，2022年，8月28日 例如,荧光假单胞菌,能同化葡萄糖；芸苔丝孢酵母可同化乙醇,因此可分别用来制备葡萄糖和乙醇传感器，这两种细菌在同化底物时,均消耗溶液中的氧,因此可用氧电极来测定 基于不同类型的信号转换器,常见的微生物传感器有电化学型、光学型、热敏电阻型、压电高频阻抗型和燃料电池型， 第三十九页，共五十八页，2022年，8月28日 第四十页，共五十八页，2022年，8月28日 抗体（antibody） 抗体是一种免疫球蛋白．免疫球蛋白有5种，分别命名为IgG，IgA，IgM，IgD和IgE. 无脊椎动物不产生免疫球蛋白．鱼有IgM,两栖类有IgM和IgG. 除人类有5种免疫球蛋白外，大多数哺乳动物只有IgG，IgA,IgM和IgE四种免疫球蛋白． 抗原（antigen） 抗原是一种进入机体后能刺激机体产生免疫反应的物质． 它可能是生物体(如各种微生物),也可能是非生物体(如各种异类蛋白、多糖等). 通常，分子量大于10000，而且具有一定结构（如苯环或杂环等结构）的物质均可成为抗原性物质，都能有效地诱发产生抗体． 3.4 免疫传感器(Immunosensor) 第四十一页，共五十八页，2022年，8月28日 第一页，共五十八页，2022年，8月28日 1 生物传感器的基本概念 生物传感器通常是指由一种生物敏感部件和转化器紧密结合,对特定种类化学物质或生物活性物质具有选择性和可逆响应的分析装置。 它是发展生物技术必不可少的一种先进的检测与监控方法,也是对物质在分子水平上进行快速和微量分析的方法 第二页，共五十八页，2022年，8月28